甜味蛋白是一種天然新型甜味劑，甜度高、熱量低，所制成的食品適于糖尿病患者食用。采用基因工程將甜味蛋白基因?qū)敕?，可改善果實品質(zhì)，下圖為部分技術環(huán)節(jié)的示意圖。
請回答：
（1）在構(gòu)建基因表達載體時，應選用圖中所示的限制酶 XbaⅠ、HindⅢXbaⅠ、HindⅢ對相關DNA進行切割。若采用PCR擴增甜味蛋白基因，則應根據(jù) a、da、d（從圖1中的a、b、c、d中選填）序列設計引物。圖2中所示的卡那霉素抗性基因的作用是 篩選含目的基因的農(nóng)桿菌篩選含目的基因的農(nóng)桿菌。
（2）gusA基因是取自大腸桿菌的一種水解酶基因，其表達出的GUS能將培養(yǎng)基中人工合成的物質(zhì)X-Cluc水解而呈藍色。以gusA基因為標記基因檢測甜味蛋白基因是否導入番茄細胞，則構(gòu)建的重組質(zhì)粒中gusA基因插入的位置應為 ②或④②或④（從圖2中的①②③④中選填），理由是 gusA基因插入②或④位置，才能通過T-DNA整合到番茄細胞的染色體上，并保證該基因不會被限制酶切除gusA基因插入②或④位置，才能通過T-DNA整合到番茄細胞的染色體上，并保證該基因不會被限制酶切除。
（3）若要使甜味蛋白基因只在番茄果實中表達而在其他組織器官中不表達，以減少物質(zhì)和能量的損耗，從而有利于植株的生長，則基因表達載體的啟動子應為 能在番茄果實細胞中特異性表達的基因的啟動子能在番茄果實細胞中特異性表達的基因的啟動子。檢測甜味蛋白基因是否轉(zhuǎn)錄，應以 番茄果實細胞的mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄而獲得的cDNA番茄果實細胞的mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄而獲得的cDNA為PCR擴增模板，擴增后再進行電泳鑒定。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】XbaⅠ、HindⅢ；a、d；篩選含目的基因的農(nóng)桿菌；②或④；gusA基因插入②或④位置，才能通過T-DNA整合到番茄細胞的染色體上，并保證該基因不會被限制酶切除；能在番茄果實細胞中特異性表達的基因的啟動子；番茄果實細胞的mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄而獲得的cDNA
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/9 8:0:9組卷：7引用：2難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6