鐵皮石斛作為一種集觀賞和藥用價值于一身的重要中藥材,在人們長期掠奪式采挖與生存條件的破壞下,野生資源瀕臨滅絕,藥材價格不斷攀升。現(xiàn)利用農桿菌介導的鐵皮石斛遺傳轉化方法,不僅能上調植物有益成分表達水平,還能增強其抗逆性和抗病蟲能力,同時還能控制其生長發(fā)育進程,以利市場需求。請回答下列問題:
(1)農桿菌的活化培養(yǎng):挑取農桿菌于 液體液體(填“液體”或“固體”)培養(yǎng)基中活化并擴大培養(yǎng),培養(yǎng)基中含有0.5%氯化鈉,其作用是 調節(jié)滲透壓(調節(jié)滲透壓和提供無機鹽營養(yǎng))調節(jié)滲透壓(調節(jié)滲透壓和提供無機鹽營養(yǎng))。
(2)侵染石斛原球莖:挑選生長狀態(tài)良好、顏色呈嫩綠色、質地均勻且較為松散的原球莖置于36-45khz條件下超聲波處理1-3min,把原球莖切割為3-5mm方塊,再對其進行 消毒消毒處理后浸入農桿菌侵染液。該過程中超聲波和對原球莖進行切割處理的目的是 消毒超聲波和切割處理造成球莖微損傷,有利于提高農桿菌的感染效率消毒超聲波和切割處理造成球莖微損傷,有利于提高農桿菌的感染效率。
(3)共培養(yǎng)和篩選:侵染結束后,用濾紙吸干原球莖上多余侵染液,然后迅速將原球莖轉移至共培養(yǎng)基培養(yǎng);培養(yǎng)基中的蔗糖的作用是 提供碳源(提供碳源和維持滲透壓)提供碳源(提供碳源和維持滲透壓)。將共培養(yǎng)后的原球莖用 無菌水無菌水沖洗4-5次,再用濃度為480-520mg/L的頭孢溶液清洗1-2min,將原球莖用濾紙吸干水分,迅速置于篩選培養(yǎng)基中培養(yǎng)。該過程中使用頭孢類抗生素的作用是 無菌水殺滅農桿菌及其他雜菌無菌水殺滅農桿菌及其他雜菌。
(4)植株再生:將篩選得到的原球莖接種于篩選培養(yǎng)基中培養(yǎng),待分化出芽后轉入 生根培養(yǎng)基生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)至組培苗,后要進行煉苗操作,煉苗目的是 提高試管苗對外部環(huán)境的適應能力提高試管苗對外部環(huán)境的適應能力。
(5)實驗過程中用不同種類、濃度的激素對鐵皮石斛原球莖形成愈傷組織和不定芽進行了研究,具體的實驗結果如下表所示:
培養(yǎng)基號 | 培養(yǎng)基(MS) | 6-BA(mg/L) | 2,4-D(mg/L) | 蔗糖(g/L) | 接種數(個) | 原球莖死亡數(個) | 誘導愈傷組織數(個) | 每塊愈傷不定芽數(個) |
1 | 12 | 0.5 | 1.2 | 30 | 30 | 5 | 25 | 3 |
2 | 12 | 1.0 | 1.5 | 20 | 30 | 4 | 26 | 3 |
3 | 12 | 1.25 | 0.8 | 25 | 30 | 3 | 27 | 11 |
4 | 32 | 0.5 | 1.5 | 25 | 30 | 6 | 24 | 3 |
5 | 32 | 1.0 | 0.8 | 30 | 30 | 4 | 26 | 7 |
6 | 32 | 1.25 | 1.2 | 20 | 30 | 3 | 27 | 5 |
3
3
號培養(yǎng)基,判斷的依據是 接種相同數量的原球莖,原球莖死亡數低,誘導愈傷組織數和每塊愈傷不定芽數高
接種相同數量的原球莖,原球莖死亡數低,誘導愈傷組織數和每塊愈傷不定芽數高
。【答案】液體;調節(jié)滲透壓(調節(jié)滲透壓和提供無機鹽營養(yǎng));消毒;消毒超聲波和切割處理造成球莖微損傷,有利于提高農桿菌的感染效率;提供碳源(提供碳源和維持滲透壓);無菌水;無菌水殺滅農桿菌及其他雜菌;生根培養(yǎng)基;提高試管苗對外部環(huán)境的適應能力;3;接種相同數量的原球莖,原球莖死亡數低,誘導愈傷組織數和每塊愈傷不定芽數高
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/7/25 8:0:9組卷:34引用:1難度:0.5
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1.下列有關月季花藥培養(yǎng)的敘述,正確的是( ?。?br />①月季花粉是由花粉母細胞經過減數分裂而形成的單倍體生殖細胞
②被子植物花粉形成過程中的四分體與高等動物精子形成過程中的四分體概念相同
③被子植物一個小孢子母細胞經過分裂共形成了8個精子
④任何時期的花粉都可以經過培養(yǎng)產生愈傷組織或胚狀體
⑤花藥培養(yǎng)初期不需要光照,幼小植株形成后才需要光照.A.①③⑤ B.②④⑤ C.②③④ D.①②③④⑤ 發(fā)布:2024/12/21 8:0:2組卷:83難度:0.7 -
2.下列有關月季花藥培養(yǎng)的敘述,正確的是( ?。?br />①月季花粉是由花粉母細胞經過減數分裂形成的,因此是單倍體的生殖細胞
②花粉的發(fā)育要依次經歷單核期、小孢子四分體時期和雙核期等階段
③被子植物一個小孢子母細胞經過分裂共形成8個精子
④任何時期的花粉都可以經過培養(yǎng)產生愈傷組織或胚狀體
⑤花藥培養(yǎng)初期不需要光照,幼小植株形成后才需要光照
⑥被子植物花粉形成過程中的四分體與高等動物精子形成過程中的四分體概念相同
⑦花粉發(fā)育經歷雙核期時,兩個細胞核中的遺傳物質相同
⑧在花藥培養(yǎng)中,特別是通過愈傷組織形成的花粉植株,染色體組的數目常常會發(fā)生變化.A.①③⑤⑦⑧ B.②④⑤⑦⑧ C.①③④⑦⑧ D.①②③④⑤ 發(fā)布:2024/12/21 8:0:2組卷:17難度:0.5 -
3.下列有關月季花藥培養(yǎng)的敘述,錯誤的是( ?。?br />①月季花粉是由花粉母細胞經過減數分裂直接形成的單倍體生殖細胞;
②被子植物花粉形成過程中的四分體與高等動物精子形成過程中的四分體概念不同;
③被子植物一個小孢子母細胞經過減數分裂最終共形成了8個精子;
④任何時期的花粉都可以經過培養(yǎng)產生愈傷組織或胚狀體;
⑤在花藥培養(yǎng)中,特別是通過胚狀體形成的花粉植株,染色體組的數目常常會發(fā)生變化.A.①③⑤ B.①④⑤ C.①②③ D.③④⑤ 發(fā)布:2024/12/21 8:0:2組卷:49難度:0.9
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