下表中列出了幾種限制酶識(shí)別序列及其割位點(diǎn)，圖一、圖二中箭頭表示相關(guān)限制酶的位點(diǎn)．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
| 限制酶 | BamH I | HindⅢ | EcoR I | Sma I |
| 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) | ↓ GGATCC CCTAGG ↑ |
↓ AAGCTT TTCGAA ↑ |
↓ GAATTC CTTAAG ↑ |
↓ CCCGGG GGGCCC ↑ |
（1）一個(gè)圖一所示的質(zhì)粒分子經(jīng)Sma I切割前后，分別含有
0、2
0、2
個(gè)游離的磷酸基團(tuán)．（2）若對(duì)圖一中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入Sma I 酶切位點(diǎn)越多，質(zhì)粒的穩(wěn)定性越
高
高
．（3）用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用Sma I切割，原因是
SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因
．（4）與只是用EcoR I 相比較，使用BamH I和HindⅢ兩種限制酶同時(shí)處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點(diǎn)在于可以防止
質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化
質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化
．（5）為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入
DNA連接酶
DNA連接酶
．（6）重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了
鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞
鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞
．【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】0、2；高；SmaⅠ會(huì)破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因；質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化；DNA連接酶；鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：12引用：3難度：0.1
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6