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菁優(yōu)網(wǎng)癌癥患者進(jìn)行化療或放療之后,體內(nèi)白細(xì)胞數(shù)量大幅度降低,可以注射粒細(xì)胞——巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)增加白細(xì)胞的數(shù)量。在自然條件下,此細(xì)胞因子的含量很低,很難獲得。某科研團(tuán)隊將人的GMCSF基因?qū)氪竽c桿菌,大量生產(chǎn)重組GM-CSF,滿足了臨床需求?;卮鹣铝袉栴}:
(1)從人血液中提取mRNA通過
反轉(zhuǎn)錄
反轉(zhuǎn)錄
過程獲得DNA,再以DNA為模板,利用
PCR
PCR
技術(shù)擴增GMCSF基因。使用該技術(shù)時,需加入耐高溫的DNA聚合酶,其作用是
催化合成DNA子鏈
催化合成DNA子鏈
。
(2)質(zhì)粒通常含有抗生素抗性基因,該基因的作用是
便于將含入的GMCSF基因的受體細(xì)胞篩選出來
便于將含入的GMCSF基因的受體細(xì)胞篩選出來
。構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中,人的GMCSF基因與質(zhì)粒通常使用相同的限制酶進(jìn)行切割,原因是
用相同的限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒能產(chǎn)生相同的末端,以便連接
用相同的限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒能產(chǎn)生相同的末端,以便連接
。
(3)大腸桿菌作為受體細(xì)胞的優(yōu)點是
繁殖快、為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少
繁殖快、為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少
(答出2點)。在添加了該抗生素的培養(yǎng)基中得到了4個大腸桿菌菌落,從菌落中提取相關(guān)物質(zhì),進(jìn)行進(jìn)一步檢測,檢測結(jié)果如圖所示。根據(jù)結(jié)果顯示,應(yīng)選擇
4
4
號菌落進(jìn)行擴大培養(yǎng)。

【答案】反轉(zhuǎn)錄;PCR;催化合成DNA子鏈;便于將含入的GMCSF基因的受體細(xì)胞篩選出來;用相同的限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒能產(chǎn)生相同的末端,以便連接;繁殖快、為單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少;4
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:1引用:1難度:0.7
相似題
  • 菁優(yōu)網(wǎng)1.圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒,其中tar為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因;mel為黑色素合成基因,其表達(dá)能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?;卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(ug/mL) 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長;-表示不生長。
    (1)限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列,并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂,切割形成的末端有
     
    兩種。
    (2)以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因,與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進(jìn)行置換,構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是
     
    。
    (3)導(dǎo)入目的基因時,首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細(xì)胞,再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細(xì)胞混合,在一定的溫度下可以促進(jìn)鏈霉菌完成
     
    過程。
    (4)不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細(xì)胞,所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上,挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用,第一步需檢測受體細(xì)胞的
     
    (填“DNA”或“RNA”),檢測方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布:2024/11/5 22:30:2組卷:21引用:3難度:0.6
  • 2.胰蛋白酶抑制劑(TI)可抑制昆蟲蛋白酶活性,阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細(xì)胞壁的單細(xì)胞真核綠藻,是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達(dá)載體,并將其導(dǎo)入鹽藻細(xì)胞中,進(jìn)行了一系列實驗?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)研究人員利用PCR技術(shù)特異性地擴增目的基因的前提是需要
     
    ,以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要,將處理溫度控制在90~95℃,是為了
     
    。
    (2)獲取目的基因后,為了構(gòu)建基因表達(dá)載體,還需要使用的酶是
     
    (答出2種)。構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、
     
    (答出3種)等結(jié)構(gòu)。
    (3)研究人員將TI基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進(jìn)行了檢測,相關(guān)步驟和實驗結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析,該實驗結(jié)果說明
     
    組別 實驗步驟 實驗結(jié)果
    轉(zhuǎn)基因鹽藻(A組) 離心收集三組細(xì)
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品
    將TI注射到大白
    兔體內(nèi),獲取TI
    抗體
    讓TI抗體和樣品
    進(jìn)行混合檢測
    有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻(B組) 無雜交帶
    陽性對照組(C組) 有雜交帶

    發(fā)布:2024/11/3 15:30:2組卷:5引用:4難度:0.7
  • 3.我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉,下列說法錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/4 19:0:2組卷:1引用:1難度:0.7
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