傳統(tǒng)影像學診斷在發(fā)現(xiàn)轉移瘤形成時往往已延誤最佳治療時機。目前可通過液體活檢來檢查血液中的循環(huán)腫瘤細胞(CTCs),用以診斷是否存在癌癥轉移,步驟如下:注:上皮組織細胞來源的CTCs與正常白細胞表面蛋白質的一些差異(如表)
表 細胞表面抗原標志物表達差異
蛋白種類 細胞類型 |
CD45 | EpCAM |
白細胞 | 有 | 無 |
CTCs | 無 | 有 |
(1)制備單克隆抗體:首先用CD45蛋白對小鼠進行免疫,然后經(jīng)過如圖的①、②、③、④等步驟,獲得大量單克隆抗體A;再用EpCAM免疫小鼠,經(jīng)過相同步驟獲得單克隆抗體B。
步驟①涉及到的細胞工程技術主要有
動物細胞融合
動物細胞融合
和 動物細胞培養(yǎng)
動物細胞培養(yǎng)
。步驟②通常使用選擇培養(yǎng)基,主要目的是篩選出
雜交瘤細胞
雜交瘤細胞
。步驟③主要需要經(jīng)過和抗體檢測,并經(jīng)多次篩選,最終獲得
產生特定抗體的雜交瘤細胞
產生特定抗體的雜交瘤細胞
。步驟④是大規(guī)模培養(yǎng),主要方法有:
體內培養(yǎng)
體內培養(yǎng)
和 體外培養(yǎng)
體外培養(yǎng)
。體外培養(yǎng)到一定時期的單克隆雜交瘤細胞會因為 細胞密度過大、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質缺乏等
細胞密度過大、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質缺乏等
(至少答出兩點)而分裂受阻,需進行傳代培養(yǎng)。(2)利用免疫磁珠進行分離:取待測人員少量血液于采集管內,將連接有單克隆抗體
A
A
(填“A”或“B”)的磁珠加入采集管,外加磁場使磁珠定向移動到指定區(qū)域并取出,這樣可以排除非腫瘤細胞的干擾;再將連接有單克隆抗體 B
B
(填“A”或“B”)的磁珠加入采集管,外加磁場使磁珠定向移動到指定區(qū)域取出,收集CTCs。(3)計數(shù)并診斷:若出現(xiàn)
CTCs陽性
CTCs陽性
(細胞)數(shù)量超出正常范圍,即可診斷發(fā)生癌細胞轉移。【考點】單克隆抗體及其應用.
【答案】動物細胞融合;動物細胞培養(yǎng);雜交瘤細胞;產生特定抗體的雜交瘤細胞;體內培養(yǎng);體外培養(yǎng);細胞密度過大、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質缺乏等;A;B;CTCs陽性
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:10引用:1難度:0.6
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1.為實現(xiàn)對肝癌的有效治療,研究人員通過比較肝腫瘤細胞和正常細胞間的差異,篩選有效的免疫治療靶點,制備相應單克隆抗體并構建抗體—藥物偶聯(lián)物。
(1)檢測發(fā)現(xiàn)細胞的CLDN6蛋白能夠促進腫瘤發(fā)生,選定其作為單克隆抗體的作用靶點。CLDN6蛋白是一個跨膜蛋白,包括胞外區(qū)、跨膜區(qū)和胞內區(qū),制備免疫小鼠所用的抗原時,應提取
(2)將CLDN6蛋白抗原注射到小鼠體內,從該小鼠脾臟中獲取
(3)將該單克隆抗體與抗癌藥物DMI 結合構建抗體—藥物偶聯(lián)物(CLDN6-DMI)。用不同濃度的游離DMI、CLDN6-DMI或lgG-DMI(無關抗體-DMI)分別處理高表達CLDN6細胞和低表達CLDN6細胞,檢測細胞活力,結果如圖1:
由圖可知,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞,依據(jù)是
(4)如圖2表示抗體—藥物偶聯(lián)物CLDN6-DMI的作用機制:由圖分析,CLDN6-DMI能特異性殺傷高表達CLDN6細胞的原因是發(fā)布:2024/12/19 7:0:1組卷:3引用:1難度:0.6 -
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發(fā)布:2024/12/19 1:0:1組卷:39引用:4難度:0.5 -
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發(fā)布:2024/12/19 6:0:1組卷:42引用:2難度:0.6
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