基因X僅在水稻體細(xì)胞和精子中表達(dá)蛋白X，在卵細(xì)胞中不能轉(zhuǎn)錄。為研究基因 X表達(dá)對水稻卵細(xì)胞的影響，進(jìn)行如下實(shí)驗(yàn)：
（1）從水稻體細(xì)胞提取基因X的mRNA，首先需破碎細(xì)胞，經(jīng)離心后獲得

細(xì)胞溶膠

細(xì)胞溶膠

，利用基因X的局部特定短序列做

DNA（基因）探針

DNA（基因）探針

，從中釣取相應(yīng)mRNA經(jīng)

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

后獲取目的基因。
（2）將基因X編碼序列與Luc基因（熒光素酶基因，熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光）拼接成X-Luc融合基因（表達(dá)的蛋白質(zhì)能保留兩種蛋白質(zhì)各自的功能），并將融合基因插入到

Ti質(zhì)粒

Ti質(zhì)粒

的T-DNA中，利用

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

法將融合基因轉(zhuǎn)入水稻愈傷組織。
（3）經(jīng)修飾處理的T-DNA上

啟動子（啟動部位）

啟動子（啟動部位）

可與卵細(xì)胞RNA聚合酶結(jié)合，從而在轉(zhuǎn)基因水稻卵細(xì)胞中能表達(dá)基因X。分離并培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因水稻卵細(xì)胞，添加

熒光素

熒光素

即可篩選出成功表達(dá)基因X的卵細(xì)胞。
（4）水稻卵細(xì)胞在未受精時一般不進(jìn)行發(fā)育，從轉(zhuǎn)基因植株未成熟種子中分離出胚，觀察到細(xì)胞內(nèi)僅含一個染色體組，表明基因 X對水稻卵細(xì)胞的影響可能是

X基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚

X基因表達(dá)能使卵細(xì)胞不經(jīng)受精直接發(fā)育成胚

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