S蛋白是新冠病毒（SARS-CoV-2）感染機(jī)體的關(guān)鍵組分，也是研制新冠疫苗的關(guān)鍵起點(diǎn)。如圖為陳薇團(tuán)隊(duì)以缺失 E1等基因的人復(fù)制缺陷腺病毒（E1基因是腺病毒基因組復(fù)制的關(guān)鍵基因）為載體的新冠疫苗研制流程示意圖。

請(qǐng)回答：
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)需要插入啟動(dòng)子，啟動(dòng)子的基本組成單位是
脫氧核苷酸
脫氧核苷酸
，能識(shí)別啟動(dòng)子的酶是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
。
（2）HEK 細(xì)胞是一種特殊的人胚胎腎源細(xì)胞，在該細(xì)胞中，質(zhì)粒Ⅰ和質(zhì)粒Ⅱ可進(jìn)行同源重組形成含S蛋白基因的復(fù)制缺陷重組腺病毒。為保證上述重組腺病毒能夠大量復(fù)制，HEK細(xì)胞應(yīng)含有
E1
E1
基因及其表達(dá)產(chǎn)物。對(duì)獲得的重組腺病毒除用 PCR 檢測(cè) S 蛋白基因外，還需要用
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
的方法檢測(cè)S蛋白。
（3）圖中將含S蛋白基因的復(fù)制缺陷重組腺病毒進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng)的操作是
先在體外大量培養(yǎng)HEK 細(xì)胞，然后接種含S蛋白基因的復(fù)制缺陷重組腺病毒，繼續(xù)培養(yǎng)一段時(shí)間
先在體外大量培養(yǎng)HEK 細(xì)胞，然后接種含S蛋白基因的復(fù)制缺陷重組腺病毒，繼續(xù)培養(yǎng)一段時(shí)間
。
（4）與復(fù)制型腺病毒相比，利用復(fù)制缺陷重組腺病毒為載體制各成的疫苗具有更高的安全性，其原因是
該疫苗不會(huì)在人體細(xì)胞中復(fù)制
該疫苗不會(huì)在人體細(xì)胞中復(fù)制
。

【答案】脫氧核苷酸；RNA聚合酶；E1；抗原-抗體雜交；先在體外大量培養(yǎng)HEK 細(xì)胞，然后接種含S蛋白基因的復(fù)制缺陷重組腺病毒，繼續(xù)培養(yǎng)一段時(shí)間；該疫苗不會(huì)在人體細(xì)胞中復(fù)制

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/5/12 8:0:9組卷：4引用：1難度：0.6

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1．胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性，阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細(xì)胞壁的單細(xì)胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長(zhǎng)的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達(dá)載體，并將其導(dǎo)入鹽藻細(xì)胞中，進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)?；卮鹣铝袉栴}：
（1）研究人員利用PCR技術(shù)特異性地?cái)U(kuò)增目的基因的前提是需要

，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了

。
（2）獲取目的基因后，為了構(gòu)建基因表達(dá)載體，還需要使用的酶是

（答出2種）。構(gòu)建成功的基因表達(dá)載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動(dòng)子、

（答出3種）等結(jié)構(gòu)。
（3）研究人員將TI基因?qū)胧荏w細(xì)胞后進(jìn)行了檢測(cè)，相關(guān)步驟和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如表所示。該檢測(cè)方法依據(jù)的原理是

。據(jù)表分析，該實(shí)驗(yàn)結(jié)果說明

。

組別實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)結(jié)果

① ② ③

轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組）離心收集三組細(xì)
胞制備可溶性蛋
白質(zhì)樣品將TI注射到大白
兔體內(nèi)，獲取TI
抗體讓TI抗體和樣品
進(jìn)行混合檢測(cè) 有雜交帶

非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組）無雜交帶

陽性對(duì)照組（C組）有雜交帶

發(fā)布：2024/11/3 15:30:2組卷：5引用：4難度：0.7

發(fā)布：2024/11/5 22:30:2組卷：21引用：3難度：0.6

A．科學(xué)家已對(duì)Bt基因的序列信息、表達(dá)產(chǎn)物等有了較為深入的了解

B．篩選Bt基因后可以利用PCR技術(shù)對(duì)其進(jìn)行大量的擴(kuò)增

C．培育轉(zhuǎn)基因抗蟲棉的核心工作是將Bt基因?qū)朊藁?xì)胞中

D．檢查轉(zhuǎn)基因抗蟲棉是否培育成功首先要進(jìn)行分子水平的檢測(cè)

發(fā)布：2024/11/4 19:0:2組卷：1引用：1難度：0.7

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