當(dāng)前位置： 2021年江西省南昌二中、河南省實(shí)驗(yàn)中學(xué)高考生物聯(lián)考試卷（5月份）> 試題詳情

為了研究低溫誘導(dǎo)對(duì)某基因的啟動(dòng)子P活性的影響，科研人員進(jìn)行了啟動(dòng)子P的PCR提取、特定表達(dá)載體的構(gòu)建和轉(zhuǎn)基因煙草的功能鑒定。該基因及其啟動(dòng)子P的結(jié)構(gòu)及相應(yīng)限制酶的切割位點(diǎn)如圖1所示，如圖1中灰色區(qū)域堿基序列是已知的，啟動(dòng)子P（圖中黑色區(qū)域）及上游堿基序列未知，片段I和片段II中的字母A～F均表示引物。請(qǐng)回答下列問題。

（1）啟動(dòng)子是
RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合
RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合
的位點(diǎn)。不能直接根據(jù)片段I擴(kuò)增啟動(dòng)子P的原因是
啟動(dòng)子P及左側(cè)的序列未知，無(wú)法合成PCR所需要的引物
啟動(dòng)子P及左側(cè)的序列未知，無(wú)法合成PCR所需要的引物
。
（2）為了能擴(kuò)增正常啟動(dòng)子P，科研人員先用
酶1和DNA連接
酶1和DNA連接
酶處理上圖中的片段I，使片段I成為環(huán)狀DNA；再將環(huán)狀DNA用
酶2
酶2
（填“酶1”或“酶2”）處理得到了片段II，如圖2所示。根據(jù)片段II能不能擴(kuò)增出啟動(dòng)子P？若能，請(qǐng)寫出可選用的引物組合（用C、D、E、F表示），若不能請(qǐng)說明理由
能，可選用的引物組合是D和E
能，可選用的引物組合是D和E
。

（3）已知卡那霉素可抑制煙草細(xì)胞的生長(zhǎng)，基因M可在煙草的根部正常表達(dá)，其表達(dá)產(chǎn)物可將X-Gluc水解生成藍(lán)色物質(zhì)。將啟動(dòng)子P和基因M結(jié)合并與含有卡那霉素抗性基因的Ti-質(zhì)粒重組構(gòu)建基因表達(dá)載體。將表達(dá)載體和酚類物質(zhì)混合后加入含有煙草細(xì)胞的培養(yǎng)基中，酚類物質(zhì)的作用是
吸引農(nóng)桿菌感染煙草細(xì)胞
吸引農(nóng)桿菌感染煙草細(xì)胞
。再用含有
卡那霉素
卡那霉素
的培養(yǎng)基篩選出所需的煙草細(xì)胞，然后經(jīng)過
組織培養(yǎng)
組織培養(yǎng)
獲得轉(zhuǎn)基因煙草植株。
（4）將上述轉(zhuǎn)基因煙草植株分為A、B兩組，A組在常溫（25℃，對(duì)照組）下培養(yǎng)，B組在低溫（4℃，實(shí)驗(yàn)組）下培養(yǎng)，一段時(shí)間后取A、B的幼根，浸入適量
X-Gluc
X-Gluc
溶液中，觀察煙草細(xì)胞中基因M的表達(dá)情況（表達(dá)強(qiáng)度越大，細(xì)胞表現(xiàn)的藍(lán)色越深）。若A、B組的結(jié)果分別為
A藍(lán)色較深、B藍(lán)色較淺
A藍(lán)色較深、B藍(lán)色較淺
，則說明低溫抑制啟動(dòng)子P的功能。

【答案】RNA聚合酶識(shí)別并結(jié)合；啟動(dòng)子P及左側(cè)的序列未知，無(wú)法合成PCR所需要的引物；酶1和DNA連接；酶2；能，可選用的引物組合是D和E；吸引農(nóng)桿菌感染煙草細(xì)胞；卡那霉素；組織培養(yǎng)；X-Gluc；A藍(lán)色較深、B藍(lán)色較淺

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：34引用：4難度：0.7

相似題

1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />

A．若某基因是從人的細(xì)胞內(nèi)提取mRNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄形成的，則該基因中不含啟動(dòng)子序列

B．?dāng)U增目的基因時(shí)，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3′-端進(jìn)行子鏈合成

C．導(dǎo)入人血清白蛋白基因的綿羊受體細(xì)胞是乳腺細(xì)胞

D．利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法可將含有目的基因的重組質(zhì)粒整合到植物受體細(xì)胞的染色體DNA上

發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

解析

2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng)，嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命，因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國(guó)科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
（1）通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是

（填寫下列編號(hào)）。
①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
②選用合適的方法獲取目的基因
③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標(biāo)蛋白
④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
（2）在PCR過程中，引物的功能是

。
A．啟動(dòng)DNA復(fù)制
B．規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
C．解旋DNA雙鏈
D．充當(dāng)復(fù)制模板

（3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的

。
（4）獲取目的基因后，需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是

（填DNA或RNA/DNA或RNA）。
（5）在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中，溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的

。
（6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用

和

切開，才能與MCO片段高效連接。
（7）下列實(shí)驗(yàn)操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是

。
A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長(zhǎng)與否加以鑒別
發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
解析
3．用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個(gè)堿基對(duì)）的長(zhǎng)鏈，而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長(zhǎng)度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端）。

若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長(zhǎng)度為（　?。?/h2>
A．2.5和5.5 B．2.5和6 C．5.5和8 D．6和8
發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />

1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是（　?。?br />