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人的血清白蛋白(HSA)在臨床上需求量很大,通常從人血中提取。但由于艾滋病病毒(HIV)等人類感染性病原體造成的威脅與日俱增,使人們對血液制品顧慮重重。圖一是以基因工程技術獲取HSA的兩條途徑,其中報告基因表達的產物能催化無色物質K呈現藍色。圖二為HSA基因兩側的核苷酸序列。圖三為相關限制酶的識別序列和切割位點。據圖回答下列問題:
菁優(yōu)網
(1)基因工程的核心步驟是
基因表達載體的構建
基因表達載體的構建
,完成過程②所需要技術手段是
植物組織培養(yǎng)
植物組織培養(yǎng)

(2)采用PCR技術擴增HSA基因,根據其兩端序列,則需要選擇的一對引物序列是
A C
A C
。
A.引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是5′-GTAAGTTAAGAG-3′
B.引物Ⅰ是5′-AATGGATCCTTC-3′,引物Ⅱ是5′-CATTCAATTCTC-3′
C.引物Ⅰ是5′-GAAGGATCCATT-3′,引物Ⅱ是5′-GTAAGTTAAGAG-3′
D.引物Ⅰ是5′-GAAGGATCCATT-3′,引物Ⅱ是5′-GAGAATTGAATG-3′
(3)依據圖一、圖二和圖三分析,下列敘述錯誤的是
C
C
。
A.應該使用酶B和酶C獲取HSA基因
B.應該使用酶A和酶B切割Ti質粒
C.成功建構的重組質粒含1個酶A的識別位點
D.成功建構的重組質粒用酶C處理將得到2個DNA片段
(4)圖一過程①中需將植物細胞與
農桿菌
農桿菌
混合后共同培養(yǎng),旨在讓
T-DNA
T-DNA
整合到植物細胞染色體DNA上;除盡農桿菌后,還須轉接到含
物質K
物質K
的培養(yǎng)基上篩選出轉化的植物細胞。
(5)過程④前對卵細胞供體母牛進行
超數排卵
超數排卵
處理。過程通常將受精卵培養(yǎng)至
桑葚胚或囊胚
桑葚胚或囊胚
階段。過程⑤鑒定胚胎性別時常取
滋養(yǎng)層
滋養(yǎng)層
細胞做DNA分析。
(6)為檢測HSA基因的表達情況,可提取受體細胞的
蛋白質
蛋白質
,用抗血清白蛋白的抗體進行雜交實驗。

【答案】基因表達載體的構建;植物組織培養(yǎng);A C;C;農桿菌;T-DNA;物質K;超數排卵;桑葚胚或囊胚;滋養(yǎng)層;蛋白質
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有,未經書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:25難度:0.7
相似題
  • 菁優(yōu)網1.圖示PIJ702是一種常用質粒,其中tar為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因;mel為黑色素合成基因,其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?;卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(ug/mL) 0 1 2 5 10
    不含質粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長;-表示不生長。
    (1)限制性核酸內切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列,并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂,切割形成的末端有
     
    兩種。
    (2)以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因,與質粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進行置換,構建重組質粒pZHZ8。上述兩種質粒經限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是
     
    。
    (3)導入目的基因時,首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞,再將重組質粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成
     
    過程。
    (4)不含質粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導入pZHZ8的鏈霉菌細胞,所需硫鏈絲菌素濃度至少應在
     
    μg/mL以上,挑選成功導入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用,第一步需檢測受體細胞的
     
    (填“DNA”或“RNA”),檢測方法應采用
     
    技術。

    發(fā)布:2024/11/5 22:30:2組卷:21難度:0.6
  • 2.胰蛋白酶抑制劑(TI)可抑制昆蟲蛋白酶活性,阻礙昆蟲消化蛋白質。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻,是能在高鹽條件下生長的新型生物反應器。研究人員利用基因工程技術構建TI基因的表達載體,并將其導入鹽藻細胞中,進行了一系列實驗?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)研究人員利用PCR技術特異性地擴增目的基因的前提是需要
     
    ,以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關重要,將處理溫度控制在90~95℃,是為了
     
    。
    (2)獲取目的基因后,為了構建基因表達載體,還需要使用的酶是
     
    (答出2種)。構建成功的基因表達載體應含有的結構有目的基因、啟動子、
     
    (答出3種)等結構。
    (3)研究人員將TI基因導入受體細胞后進行了檢測,相關步驟和實驗結果如表所示。該檢測方法依據的原理是
     
    。據表分析,該實驗結果說明
     
    。
    組別 實驗步驟 實驗結果
    轉基因鹽藻(A組) 離心收集三組細
    胞制備可溶性蛋
    白質樣品
    將TI注射到大白
    兔體內,獲取TI
    抗體
    讓TI抗體和樣品
    進行混合檢測
    有雜交帶
    非轉基因鹽藻(B組) 無雜交帶
    陽性對照組(C組) 有雜交帶

    發(fā)布:2024/11/3 15:30:2組卷:5難度:0.7
  • 3.我國科學家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉基因抗蟲棉,下列說法錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/4 19:0:2組卷:1引用:1難度:0.7
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