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家禽飼料中富含纖維素,但家禽消化道中缺少降解纖維素的酶,阻礙了家禽對飼料的吸收與利用。研究人員從枯草芽孢桿菌中分離出編碼纖維素酶的W基因,并借助圖1所示的質(zhì)粒載體導(dǎo)入到乳酸桿菌體內(nèi),以提高添加乳酸桿菌飼料的利用率,節(jié)省成本。圖2為克隆得到的含W基因的DNA片段?;卮鹣铝袉栴}:
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(1)啟動子是一段有特殊序列結(jié)構(gòu)的DNA片段,是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
識別和結(jié)合的部位。多數(shù)啟動子具有物種特異性,為滿足應(yīng)用需要,在圖1質(zhì)粒中插入W基因的上游應(yīng)選擇
乳酸桿菌
乳酸桿菌
(填“枯草芽孢桿菌”或“乳酸桿菌”)的啟動子。
(2)分析上述兩圖可知,應(yīng)使用限制酶
EcoRⅠ和HindⅢ
EcoRⅠ和HindⅢ
切割質(zhì)粒和含W基因的DNA片段,以獲得W基因能正確連接的重組質(zhì)粒。所得重組質(zhì)粒導(dǎo)入到乳酸桿菌后,使用含抗生素
氨芐青霉素
氨芐青霉素
(填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”)的培養(yǎng)基篩選,以得到成功導(dǎo)入W基因的乳酸桿菌。
(3)將纖維素含量為20%的培養(yǎng)基分為甲、乙、丙三組,其中甲組接種乳酸桿菌,乙組接種導(dǎo)入重組質(zhì)粒的乳酸桿菌,丙組接種導(dǎo)入普通質(zhì)粒的乳酸桿菌。相同條件下培養(yǎng)一段時間,發(fā)現(xiàn)甲、丙兩組培養(yǎng)基中纖維素的含量無變化,而乙組含量下降,試從分子水平簡要闡述出現(xiàn)上述結(jié)果的原因:
W基因在乳酸桿菌中成功表達(dá)出分解纖維素的酶
W基因在乳酸桿菌中成功表達(dá)出分解纖維素的酶
。
(4)人們也可以通過蛋白質(zhì)工程獲得作物新品種,該工程的起點(diǎn)是
預(yù)期蛋白質(zhì)的功能
預(yù)期蛋白質(zhì)的功能
,最終通過改造或合成基因來完成。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】RNA聚合酶;乳酸桿菌;EcoRⅠ和HindⅢ;氨芐青霉素;W基因在乳酸桿菌中成功表達(dá)出分解纖維素的酶;預(yù)期蛋白質(zhì)的功能
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/5/13 8:0:8組卷:14引用:1難度:0.6
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  • 1.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是( ?。?br />菁優(yōu)網(wǎng)

    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng),嚴(yán)重時甚至危及生命,因此必須對食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)?;a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    (1)通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中,溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     

    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實(shí)驗(yàn)操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     

    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進(jìn)行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個堿基對)的長鏈,而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長度的DNA片段,見圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長度為(  )

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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