如圖是將人的生長激素基因?qū)爰毦鶥細胞內(nèi)制造“工程菌”示意圖,所用載體為質(zhì)粒A.已知細菌B細胞內(nèi)不含質(zhì)粒A,也不含質(zhì)粒A上的基因,質(zhì)粒A導入細菌B后,其上的基因能得到表達,根據(jù)圖示所給信息回答下列問題:

(1)將目的基因和質(zhì)粒結(jié)合形成重組質(zhì)粒時,用同一種限制性內(nèi)切酶分別切割目的基因和質(zhì)粒,露出相同的黏性末端,將切下的目的基因片段插入質(zhì)粒的切口處再加入適量的DNA連接酶DNA連接酶,使質(zhì)粒與目的基因結(jié)合成重組質(zhì)粒。
(2)目前把重組質(zhì)粒導入細菌細胞時,效率還不高;導入完成后得到的細菌,實際上有的根本沒有導入質(zhì)粒;有的導入的是普通質(zhì)粒A;只有少數(shù)導入的是重組質(zhì)粒。此處可以通過如下步驟來鑒別得到的細菌是否導入了質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒:
將得到的細菌涂抹在一個含有氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基上,能夠生長的就是導入質(zhì)粒A或重組質(zhì)粒的,反之則沒有。此過程中體現(xiàn)了質(zhì)粒作為運載體必須具備的兩個條件具有標記基因具有標記基因、能在宿主細胞內(nèi)復制并穩(wěn)定的保存能在宿主細胞內(nèi)復制并穩(wěn)定的保存。
(3)若進一步鑒定證明細菌中導入的是普通質(zhì)粒A還是重組質(zhì)粒,將得到的細菌涂抹在一個含有四環(huán)素四環(huán)素的培養(yǎng)基上培養(yǎng),若細菌能生長能生長,則導入的是普通質(zhì)粒。如果利用DNA分子雜交原理來證明此過程,應該用放射性同位素(或熒光分子)標記的生長激素基因放射性同位素(或熒光分子)標記的生長激素基因作為探針。
(4)使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移到受體細胞內(nèi),主要是借鑒細菌或病毒侵染細胞細菌或病毒侵染細胞的途徑。
(5)目的基因表達成功后,“工程菌”明顯不同于細菌D.從變異的來源看,此變異屬于基因重組基因重組。導入細菌B細胞中的目的基因成功表達的標志是受體細胞通過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程合成出相應的蛋白質(zhì)(生長激素)受體細胞通過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程合成出相應的蛋白質(zhì)(生長激素)。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】DNA連接酶;氨芐青霉素;具有標記基因;能在宿主細胞內(nèi)復制并穩(wěn)定的保存;四環(huán)素;能生長;放射性同位素(或熒光分子)標記的生長激素基因;細菌或病毒侵染細胞;基因重組;受體細胞通過轉(zhuǎn)錄和翻譯過程合成出相應的蛋白質(zhì)(生長激素)
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:7引用:1難度:0.6
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