胰島素是治療糖尿病的特效藥,長期以來只能依靠從豬、牛等動物的胰腺中提取,100kg胰腺只能提取4~5g的胰島素,其產(chǎn)量之低和價格之高可想而知。微生物生長迅速,容易控制,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)。若將生物合成相應(yīng)藥物成分的基因?qū)胛⑸锛毎麅?nèi),讓它們產(chǎn)生相應(yīng)的藥物,不但能解決產(chǎn)量問題,還能大大降低生產(chǎn)成本。如圖為利用基因工程生產(chǎn)胰島素流程圖,請回答下列問題:
(1)目的基因克隆酶切過程和質(zhì)粒提取、酶切過程都需要一種工具是限制性核酸內(nèi)切酶限制性核酸內(nèi)切酶,為確保質(zhì)粒與克隆基因能正確連接,需要用能獲得相同黏性末端的限制酶處理質(zhì)粒和目的基因(或用兩種不同的限制酶處理質(zhì)粒和目的基因)用能獲得相同黏性末端的限制酶處理質(zhì)粒和目的基因(或用兩種不同的限制酶處理質(zhì)粒和目的基因)。
(2)基因工程生產(chǎn)胰島素轉(zhuǎn)化的宿主細胞通常是大腸桿菌,這是因為大腸桿菌線繁殖快、單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少(生長迅速,容易控制,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn))繁殖快、單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少(生長迅速,容易控制,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)),大腸桿菌細胞最常用的轉(zhuǎn)化方法是:首先用鈣離子鈣離子處理,使細胞處于感受感受態(tài),再將重組表達載體DNA分子重組表達載體DNA分子溶于緩沖液中與之混合,完成轉(zhuǎn)化過程。
(3)誘導表達過程中,首先用分子雜交分子雜交技術(shù)檢查是否形成了mRNAmRNA,其次要檢測是否合成了胰島素胰島素,所用的方法為抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交。
(4)從大腸桿菌體內(nèi)獲得的蛋白質(zhì)必須經(jīng)過分離純化,這是因為大腸桿菌體內(nèi)不只是合成胰島素一種蛋白質(zhì)大腸桿菌體內(nèi)不只是合成胰島素一種蛋白質(zhì)。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】限制性核酸內(nèi)切酶;用能獲得相同黏性末端的限制酶處理質(zhì)粒和目的基因(或用兩種不同的限制酶處理質(zhì)粒和目的基因);繁殖快、單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少(生長迅速,容易控制,適于大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn));鈣離子;感受;重組表達載體DNA分子;分子雜交;mRNA;胰島素;抗原-抗體雜交;大腸桿菌體內(nèi)不只是合成胰島素一種蛋白質(zhì)
【解答】
【點評】
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