血凝素基因（HA）編碼的血凝素是構(gòu)成流感病毒囊膜纖突的主要成分。成熟的血凝素包含HA1和HA2兩個亞單位，其中HA1含有病毒與受體相互作用的位點。IgGFc基因片段（長度為717bp）編碼人IgG抗體中的一段小肽，常作為融合蛋白標簽。蛋白質(zhì)分泌依賴于信號肽的引導，本研究中用信號肽IL-2SS代替HA自身信號肽，科研人員嘗試構(gòu)建IL-2SS/HA1/IgGFc融合蛋白表達載體，并導入大腸桿菌表達和分泌，請回答：
（1）流感病毒囊膜主要由 磷脂和蛋白質(zhì)磷脂和蛋白質(zhì)組成，囊膜上血凝素的合成場所在 宿主細胞的核糖體宿主細胞的核糖體。
（2）本實驗用信號肽IL-2SS代替HA自身信號肽有利于 融合蛋白分泌到大腸桿菌細胞外融合蛋白分泌到大腸桿菌細胞外，PCR擴增目的基因時應該選擇圖中引物 b和引物cb和引物c設計引物時，不能包含基因HA1的終止密碼子的編碼序列，原因是 防止產(chǎn)生的HA上不含IgGFc標簽防止產(chǎn)生的HA上不含IgGFc標簽。
（3）應選擇限制酶 EcoRVEcoRV來切割質(zhì)粒A，然后直接將PCR產(chǎn)物與質(zhì)粒A混合，同時加入 T4DNA連接T4DNA連接酶，使得目的基因與質(zhì)粒A相連。
（4）若目的基因與質(zhì)粒A正向連接，HA1基因轉(zhuǎn)錄時的模板鏈是由圖中的引物 cc（填“a”、“b”、“c”或“d”）在PCR時延伸而成；若目的基因與質(zhì)粒A反向連接，用BamHⅠ和SacⅠ同時切割重組質(zhì)粒，完全酶切后的產(chǎn)物進行凝膠電泳，其中最靠近加樣孔的條帶長度約為 51815181bp。
（5）融合蛋白中的標簽蛋白有利于目的蛋白的分離和純化，基因工程生產(chǎn)HA1作為疫苗時，選擇人IgGFc作為標簽的優(yōu)點還有 降低免疫排斥反應降低免疫排斥反應。
【答案】磷脂和蛋白質(zhì)；宿主細胞的核糖體；融合蛋白分泌到大腸桿菌細胞外；b和引物c；防止產(chǎn)生的HA上不含IgGFc標簽；EcoRV；T4DNA連接；c；5181；降低免疫排斥反應
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：32引用：1難度：0.6
相似題
-
1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6