研究人員利用基因敲除技術(shù)將豬的肌生成抑制蛋白基因敲除，從而得到了高骨骼肌含量的克隆豬。回答下列問題：
（1）常用基因敲除技術(shù)是通過同源重組將外源基因定點整合人靶細胞基因組上某一確定的位點，以定點修飾改造染色體上某一基因。相對傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)基因技術(shù)，該基因敲除技術(shù)的最大優(yōu)點是

克服了傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)中目的基因整合的盲目性和隨機性（能夠定點整合）

克服了傳統(tǒng)轉(zhuǎn)基因技術(shù)中目的基因整合的盲目性和隨機性（能夠定點整合）

。要實現(xiàn)敲除肌生成抑制蛋白基因的目的，首先要構(gòu)建替換型打靶載體，該過程中需要的工具酶有

限制酶和DNA連接酶

限制酶和DNA連接酶

。
（2）將替換型打靶載體通過顯微注射法導(dǎo)入豬胚胎干細胞，胚胎干細胞是從著床前胚胎分離出的

內(nèi)細胞團

內(nèi)細胞團

細胞。培養(yǎng)豬胚胎干細胞時，首先要在培養(yǎng)皿底部制備一層細胞，這層細胞一般是

胚胎成纖維細胞

胚胎成纖維細胞

。
（3）篩選出靶細胞，導(dǎo)入豬的

囊胚

囊胚

中，再將其植入代孕豬體內(nèi)，使其發(fā)育成嵌合體豬，再經(jīng)過回交、篩選就可以得到肌生成抑制蛋白基因敲除純合體。為了快速擴大基因敲除豬的種群，除進行有性生殖外，還可以采取

細胞核移植

細胞核移植

技術(shù)。為證明肌生成抑制蛋白基因敲除豬的表現(xiàn)型改變確實是由于敲除了該基因的緣故，可以采用的實驗思路是

給基因敲除豬導(dǎo)入肌生成抑制蛋白基因（或者直接注射肌生成抑制蛋白），養(yǎng)殖一段時間后觀察豬骨骼肌的生長情況

給基因敲除豬導(dǎo)入肌生成抑制蛋白基因（或者直接注射肌生成抑制蛋白），養(yǎng)殖一段時間后觀察豬骨骼肌的生長情況

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