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人感染乳頭瘤病毒（HPV）可誘發(fā)宮頸癌等惡性腫瘤，人乳頭瘤病毒疫苗可以預防由HPV引起的多種宮頸癌，是世界上第一個預防癌癥的疫苗。圖a是HPV疫苗制備所需的L1基因片段，圖b是某種質(zhì)粒載體。
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回答下列問題：
（1）基因工程的核心步驟是
基因表達載體的構建
基因表達載體的構建
，為構建重組HPV疫苗，科研人員將L1基因插入質(zhì)粒中，最好選擇限制酶
BamHI、HindⅢ
BamHI、HindⅢ
進行共同切割，原因是
不會導致標記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質(zhì)粒上的酶切位點不唯一，導致結果不可控
不會導致標記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質(zhì)粒上的酶切位點不唯一，導致結果不可控
（答出2點即可）。
（2）圖中啟動子為
RNA聚合酶
RNA聚合酶
結合位點，該處序列應根據(jù)
大腸桿菌
大腸桿菌
（填“人宮頸細胞”或“乳頭瘤病毒”或“大腸桿菌”）的RNA聚合酶識別序列來設計。
（3）若將工具酶處理目的基因和質(zhì)粒載體得到的混合物經(jīng)過連接后轉(zhuǎn)化大腸桿菌，常用
Ca2+
Ca2+
處理大腸桿菌，使其處于一種
能吸收周圍環(huán)境中DNA分子
能吸收周圍環(huán)境中DNA分子
的狀態(tài)。結果得到三種大腸桿菌：①未被轉(zhuǎn)化②含有質(zhì)粒載體③含帶有目的基因的重組質(zhì)粒。如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述三種大腸桿菌中，能夠正常生長的有
②③
②③
（填序號）﹔若將上述篩選出來的大腸桿菌，培養(yǎng)在含有卡那霉素的固體培養(yǎng)基上，能生長的是
②
②
（填序號）。
（4）若要檢測大腸桿菌是否產(chǎn)生了HPV疫苗，需要用
抗原-抗體雜交
抗原-抗體雜交
技術檢測。與傳統(tǒng)滅活疫苗相比，這樣的重組疫苗更安全又有效。從疫苗的組成成分分析，其主要原因是該疫苗不含
核酸
核酸
，所以無侵染能力。

【答案】基因表達載體的構建；BamHI、HindⅢ；不會導致標記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質(zhì)粒上的酶切位點不唯一，導致結果不可控；RNA聚合酶；大腸桿菌；Ca2+；能吸收周圍環(huán)境中DNA分子；②③；②；抗原-抗體雜交；核酸
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/24 14:0:35組卷：9引用：2難度：0.5
相似題

  • 菁優(yōu)網(wǎng)1．圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒，其中tar為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?；卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（ug/mL） 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長；-表示不生長。
    （1）限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂，切割形成的末端有
     
    兩種。
    （2）以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因，與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進行置換，構建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是
     
    。
    （3）導入目的基因時，首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞，再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成
     
    過程。
    （4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導入pZHZ8的鏈霉菌細胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應在
     
    μg/mL以上，挑選成功導入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用，第一步需檢測受體細胞的
     
    （填“DNA”或“RNA”），檢測方法應采用
     
    技術。

    發(fā)布：2024/11/5 22:30:2組卷：21引用：3難度：0.6

  • 2．胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性，阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應器。研究人員利用基因工程技術構建TI基因的表達載體，并將其導入鹽藻細胞中，進行了一系列實驗?；卮鹣铝袉栴}：
    （1）研究人員利用PCR技術特異性地擴增目的基因的前提是需要
     
    ，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了
     
    。
    （2）獲取目的基因后，為了構建基因表達載體，還需要使用的酶是
     
    （答出2種）。構建成功的基因表達載體應含有的結構有目的基因、啟動子、
     
    （答出3種）等結構。
    （3）研究人員將TI基因?qū)胧荏w細胞后進行了檢測，相關步驟和實驗結果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析，該實驗結果說明
     
    。
    組別 實驗步驟 實驗結果
    ① ② ③
    轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組） 離心收集三組細
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品    		 將TI注射到大白
    兔體內(nèi)，獲取TI
    抗體    		 讓TI抗體和樣品
    進行混合檢測    		 有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組） 無雜交帶
    陽性對照組（C組） 有雜交帶

    發(fā)布：2024/11/3 15:30:2組卷：5引用：4難度：0.7

  • 3．我國科學家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，下列說法錯誤的是（　　）

    發(fā)布：2024/11/4 19:0:2組卷：1引用：1難度：0.7
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