人感染乳頭瘤病毒（HPV）可誘發(fā)宮頸癌等惡性腫瘤，人乳頭瘤病毒疫苗可以預防由HPV引起的多種宮頸癌，是世界上第一個預防癌癥的疫苗。圖a是HPV疫苗制備所需的L1基因片段，圖b是某種質粒載體。
回答下列問題：
（1）基因工程的核心步驟是 基因表達載體的構建基因表達載體的構建，為構建重組HPV疫苗，科研人員將L1基因插入質粒中，最好選擇限制酶 BamHI、HindⅢBamHI、HindⅢ進行共同切割，原因是 不會導致標記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質粒上的酶切位點不唯一，導致結果不可控不會導致標記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質粒上的酶切位點不唯一，導致結果不可控（答出2點即可）。
（2）圖中啟動子為 RNA聚合酶RNA聚合酶結合位點，該處序列應根據(jù) 大腸桿菌大腸桿菌（填“人宮頸細胞”或“乳頭瘤病毒”或“大腸桿菌”）的RNA聚合酶識別序列來設計。
（3）若將工具酶處理目的基因和質粒載體得到的混合物經過連接后轉化大腸桿菌，常用 Ca2+Ca2+處理大腸桿菌，使其處于一種 能吸收周圍環(huán)境中DNA分子能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的狀態(tài)。結果得到三種大腸桿菌：①未被轉化②含有質粒載體③含帶有目的基因的重組質粒。如果用含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基進行篩選，在上述三種大腸桿菌中，能夠正常生長的有 ②③②③（填序號）﹔若將上述篩選出來的大腸桿菌，培養(yǎng)在含有卡那霉素的固體培養(yǎng)基上，能生長的是 ②②（填序號）。
（4）若要檢測大腸桿菌是否產生了HPV疫苗，需要用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交技術檢測。與傳統(tǒng)滅活疫苗相比，這樣的重組疫苗更安全又有效。從疫苗的組成成分分析，其主要原因是該疫苗不含 核酸核酸，所以無侵染能力。
【答案】基因表達載體的構建；BamHI、HindⅢ；不會導致標記基因都被破壞/避免目的基因自身環(huán)化/避免載體自身環(huán)化/避免目的基因反向連接到載體上/BdI在質粒上的酶切位點不唯一，導致結果不可控；RNA聚合酶；大腸桿菌；Ca2+；能吸收周圍環(huán)境中DNA分子；②③；②；抗原-抗體雜交；核酸
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/24 14:0:35組卷：10引用：2難度：0.5
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6