新冠病毒是一種單鏈RNA病毒,常用“熒光RT-PCR技術(shù)”進(jìn)行檢測,方法是取檢測者的mRNA在試劑盒中逆轉(zhuǎn)錄出cDNA,并大量擴(kuò)增,同時(shí)利用盒中熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針來檢測PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA,在檢測過程中,隨著PCR的進(jìn)行,反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,“雜交雙鏈“熒光信號的強(qiáng)度也等比例增加,可通過熒光強(qiáng)度的變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化,從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖(如圖)。請回答下列問題:
(1)題中“熒光RT-PCR技術(shù)”所用的試劑盒中應(yīng)該含有:檢測者mRNA、熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)、熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針、逆轉(zhuǎn)錄酶、引物dNFP、緩沖體系。
(2)如果要同時(shí)擴(kuò)增兩種基因,則試劑盒中的引物應(yīng)該有44種,引物的作用是使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸。
(3)如圖中“平臺期”出現(xiàn)的最可能的原因是試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈“不再增加試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈“不再增加。理論上,在檢測過程中,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說明檢測結(jié)果呈陽陽(填“陰“或“陽“)性,但為了保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般要達(dá)到或超過閾值時(shí)才確診?,F(xiàn)有甲乙兩個(gè)待檢樣本,檢測時(shí)都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線,但甲的a點(diǎn)比乙的a點(diǎn)明顯左移。請給這種結(jié)果做出科學(xué)合理的解釋(試劑盒合格且正常,操作過程規(guī)范且準(zhǔn)確):甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少。
(4)除核酸檢測外,研究人員還研發(fā)了利用生產(chǎn)單克隆抗體的技術(shù),生產(chǎn)出能與新冠病毒結(jié)合的特異性抗體。當(dāng)雜交瘤細(xì)胞在體外條件下做大規(guī)模培養(yǎng)時(shí),為防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對細(xì)胞自身造成危害,應(yīng)采取的措施是定期更換培養(yǎng)液定期更換培養(yǎng)液,最后所得抗體的優(yōu)點(diǎn)是:特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定;單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針;4;使熱穩(wěn)定DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸;試劑盒中的原料(引物、探針)數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈“不再增加;陽;甲樣本中的新冠病毒含量更高,達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少;定期更換培養(yǎng)液;特異性強(qiáng)、靈敏度高、可大量制備
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:39引用:2難度:0.7
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