甜玉米與普通玉米相比，甜玉米中可溶性糖向淀粉的轉(zhuǎn)化較慢，含可溶性糖量高，汁多質(zhì)脆，富含多種維生素。為了使甜玉米更富有生產(chǎn)應用價值，科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)培育出了超量表達P蛋白轉(zhuǎn)基因甜玉米。在超量表達P基因載體的構(gòu)建中，所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點如圖所示。
說明：強啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段；BamHⅠ、HindⅢ、EcoRⅠ、NotⅠ、SacⅠ代表不同的限制酶；T-DNA是農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上的DNA片段。
（1）為了特異性擴增P基因序列，可采用 PCRPCR的方法，一般要加入的原料為 dNTPdNTP。
（2）強啟動子是一段有特殊結(jié)構(gòu)的DNA片段，能被 RNA聚合酶RNA聚合酶識別并結(jié)合，驅(qū)動基因的持續(xù)轉(zhuǎn)錄。
（3）構(gòu)建能超量表達P基因的載體，需選用 BamHⅠ和SacⅠBamHⅠ和SacⅠ限制酶的組合和DNA連接酶。將重組Ti質(zhì)粒轉(zhuǎn)入農(nóng)桿菌，需先將農(nóng)桿菌用 CaCl2溶液CaCl2溶液處理。
（4）將玉米愈傷組織經(jīng)農(nóng)桿菌液浸泡，超量表達P基因會隨T-DNA 整合到玉米細胞的染色體DNA上整合到玉米細胞的染色體DNA上，從而獲得轉(zhuǎn)基因植物細胞。繼而進行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入 潮霉素潮霉素進行篩選，篩選出的愈傷組織經(jīng) 再分化再分化過程形成叢芽，然后在 生長素生長素（填激素名稱）較多的培養(yǎng)基上形成根，最終獲得多個玉米株系。發(fā)現(xiàn)某株系的P蛋白表達量較低，請對該現(xiàn)象作出合理的解釋：該株系玉米中可能沒有導入目的基因或目的基因未表達該株系玉米中可能沒有導入目的基因或目的基因未表達。
【考點】基因工程的操作過程綜合；植物的組織培養(yǎng)．
【答案】PCR；dNTP；RNA聚合酶；BamHⅠ和SacⅠ；CaCl2溶液；整合到玉米細胞的染色體DNA上；潮霉素；再分化；生長素；該株系玉米中可能沒有導入目的基因或目的基因未表達
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：11引用：2難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
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