干旱，鹽堿和凍害是限制植物生長(zhǎng)發(fā)育的主要逆境因子，胚胎晚期豐富蛋白（LEA）是一類(lèi)重要的植物細(xì)胞脫水保護(hù)蛋白，在抵御干旱等非生物脅迫過(guò)程中發(fā)揮著保護(hù)功能?？蒲泄ぷ髡邔M南芥的LEA基因轉(zhuǎn)入小麥體內(nèi)培育轉(zhuǎn)基因耐鹽品系小麥，以提高小麥的抗鹽堿性?；卮鹣铝袉?wèn)題：
（1）為獲取LEA基因，可以從擬南芥細(xì)胞中提取總RNA，經(jīng)過(guò)逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程得到 cDNAcDNA，再利用 PCRPCR技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增。
（2）在體外人工擴(kuò)增LEA基因的過(guò)程中，要控制反應(yīng)體系的溫度變化。加熱至90～95℃的目的是 使DNA片段受熱變性解鏈為單鏈使DNA片段受熱變性解鏈為單鏈；隨后冷卻至55～60℃，再加熱至70～75℃的目的是 進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成。
（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體是基因工程的核心，操作過(guò)程中用到的有關(guān)酶是 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。常用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞，轉(zhuǎn)基因植物的基因組中含有目的基因片段，原因是 農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA攜帶目的基因并將其轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞染色體的DNA上農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA攜帶目的基因并將其轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞染色體的DNA上。
（4）為檢測(cè)轉(zhuǎn)基因小麥?zhǔn)欠癖磉_(dá)出了LEA，常用 抗原-抗體雜交抗原-抗體雜交法進(jìn)行檢測(cè)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】cDNA；PCR；使DNA片段受熱變性解鏈為單鏈；進(jìn)行互補(bǔ)鏈的合成；限制酶和DNA連接酶；農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA攜帶目的基因并將其轉(zhuǎn)移到受體細(xì)胞染色體的DNA上；抗原-抗體雜交
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：4引用：3難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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