正當(dāng)中國各界激烈爭(zhēng)論轉(zhuǎn)基因水稻安全問題之際，在菲律賓首都馬尼拉郊外的一片稻田里，一種被稱為“金色大米”的轉(zhuǎn)基因水稻已經(jīng)悄然收獲．這種轉(zhuǎn)基因大米可以幫助人們補(bǔ)充每天必需的維生素A．由于含有可以生成維生素A的β一胡蘿卜素．它呈現(xiàn)金黃色澤，故稱“金色大米”．（摘自2010年4月＜新世紀(jì)＞周刊）“金色大米”的培育流程如圖所示．請(qǐng)回答下列問題．（已知酶I的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一G↓ GATCC一．酶II的識(shí)別序列和切點(diǎn)是一↓ GATC-）．

（1）圖中a、b所示獲得目的基因的方法是

反轉(zhuǎn)錄法

反轉(zhuǎn)錄法

，培育“金色大米”的基因工程操作四步曲中，其核心是

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

基因表達(dá)載體的構(gòu)建

．圖中c稱作

基因表達(dá)載體

基因表達(dá)載體

，它的構(gòu)成除了復(fù)制原點(diǎn)、目的基因外，還必須有

啟動(dòng)子

啟動(dòng)子

、

終止子、標(biāo)記基因

終止子、標(biāo)記基因

等．
（2）據(jù)圖分析，在構(gòu)建c的過程中，目的基因用

限制酶Ⅱ

限制酶Ⅱ

（限制酶Ⅰ或限制酶Ⅱ）進(jìn)行了切割．檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功需要利用

基因Ⅰ

基因Ⅰ

作為標(biāo)記基因．
（3）過程e運(yùn)用了細(xì)胞工程中的

植物組織培養(yǎng)

植物組織培養(yǎng)

技術(shù)，該技術(shù)的理論依據(jù)是

細(xì)胞全能性

細(xì)胞全能性

；在該技術(shù)應(yīng)用的過程中，關(guān)鍵步驟是利用含有一定營養(yǎng)和激素的培養(yǎng)基誘導(dǎo)植物細(xì)胞進(jìn)行和

脫分化再分化

脫分化再分化

．
（4）若希望該轉(zhuǎn)基因水稻生產(chǎn)的“金色大米”含維生素A含量更高、效果更好，則需要通過

蛋白質(zhì)

蛋白質(zhì)

工程手段對(duì)合成維生素A的相關(guān)目的基因進(jìn)行設(shè)計(jì)．