新冠病毒是一種單鏈RNA病毒，常用“熒光RT-PCR技術(shù)”進行檢測，方法是取檢測者的mRNA逆轉(zhuǎn)錄出cDNA，并大量擴增，時，用熒光標記的新冠病毒核酸探針來檢測PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA．請回答下列問題：
（1）“熒光RT-PCR技術(shù)”所用的試劑盒中通常都應(yīng)該含有：

逆轉(zhuǎn)錄酶

逆轉(zhuǎn)錄酶

、

熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）

熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）

、熒光標記的核酸探針、引物、dNTP、緩沖體系。
（2）如果要同時擴增兩種基因，則試劑盒中的引物應(yīng)該有

4

4

種。如圖1為新冠病毒的“ORFlab基因”對應(yīng)的cDNA片段結(jié)構(gòu)示意圖，則與之對應(yīng)的引物結(jié)合的部位應(yīng)該是圖中的

4、1

4、1

（子鏈延伸方向為其自身的5′→3′，用圖中數(shù)字作答）。若已知該基因的引物Ⅰ，能否依據(jù)其堿基序列設(shè)計出另一種引物Ⅱ？

不能

不能

，理由是

兩段引物的堿基序列沒有相關(guān)性（既不相同，也不互補）

兩段引物的堿基序列沒有相關(guān)性（既不相同，也不互補）

。

（3）在檢測過程中，隨著PCR的進行，反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積，“雜交雙鏈”熒光信號的強度也等比例增加。可通過熒光強度的變化監(jiān)測產(chǎn)物量的變化從而得到一條熒光擴增曲線圖（如圖2）。

①“平臺期”出現(xiàn)的最可能的原因是

試劑盒中的原料、引物和探針數(shù)量一定，超出一定的循環(huán)數(shù)后，熒光標記的“雜交雙鏈”不再增加

試劑盒中的原料、引物和探針數(shù)量一定，超出一定的循環(huán)數(shù)后，熒光標記的“雜交雙鏈”不再增加

。
②理論上，在檢測過程中，有熒光標記的“雜交雙鏈”出現(xiàn)，則說明檢測結(jié)果呈

陽

陽

（填“陰”或“陽”）性，但為了保證檢測結(jié)果的準確性，一般要達到或超過閾值時才確診?，F(xiàn)有兩個待檢樣本，檢測時都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線，但甲的a點比乙的a點明顯左移。請給這種結(jié)果做出科學(xué)合理的解釋（試劑盒合格且正常，操作過程規(guī)范且準確）：

甲樣本中的新冠病毒含量更高達到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少

甲樣本中的新冠病毒含量更高達到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少

。