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新冠病毒是一種單鏈RNA病毒,常用“熒光RT-PCR技術(shù)”進(jìn)行檢測(cè),方法是取檢測(cè)者的mRNA逆轉(zhuǎn)錄出cDNA,并大量擴(kuò)增,時(shí),用熒光標(biāo)記的新冠病毒核酸探針來(lái)檢測(cè)PCR產(chǎn)物中是否含有新冠病毒的cDNA.請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)“熒光RT-PCR技術(shù)”所用的試劑盒中通常都應(yīng)該含有:
逆轉(zhuǎn)錄酶
逆轉(zhuǎn)錄酶
、
熱穩(wěn)定性DNA聚合酶(Taq酶)
熱穩(wěn)定性DNA聚合酶(Taq酶)
、熒光標(biāo)記的核酸探針、引物、dNTP、緩沖體系。
(2)如果要同時(shí)擴(kuò)增兩種基因,則試劑盒中的引物應(yīng)該有
4
4
種。如圖1為新冠病毒的“ORFlab基因”對(duì)應(yīng)的cDNA片段結(jié)構(gòu)示意圖,則與之對(duì)應(yīng)的引物結(jié)合的部位應(yīng)該是圖中的
4、1
4、1
(子鏈延伸方向?yàn)槠渥陨淼?′→3′,用圖中數(shù)字作答)。若已知該基因的引物Ⅰ,能否依據(jù)其堿基序列設(shè)計(jì)出另一種引物Ⅱ?
不能
不能
,理由是
兩段引物的堿基序列沒(méi)有相關(guān)性(既不相同,也不互補(bǔ))
兩段引物的堿基序列沒(méi)有相關(guān)性(既不相同,也不互補(bǔ))
。

(3)在檢測(cè)過(guò)程中,隨著PCR的進(jìn)行,反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積,“雜交雙鏈”熒光信號(hào)的強(qiáng)度也等比例增加??赏ㄟ^(guò)熒光強(qiáng)度的變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化從而得到一條熒光擴(kuò)增曲線圖(如圖2)。

①“平臺(tái)期”出現(xiàn)的最可能的原因是
試劑盒中的原料、引物和探針數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加
試劑盒中的原料、引物和探針數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加
。
②理論上,在檢測(cè)過(guò)程中,有熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”出現(xiàn),則說(shuō)明檢測(cè)結(jié)果呈
陽(yáng)
陽(yáng)
(填“陰”或“陽(yáng)”)性,但為了保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,一般要達(dá)到或超過(guò)閾值時(shí)才確診?,F(xiàn)有兩個(gè)待檢樣本,檢測(cè)時(shí)都出現(xiàn)了上述形態(tài)的曲線,但甲的a點(diǎn)比乙的a點(diǎn)明顯左移。請(qǐng)給這種結(jié)果做出科學(xué)合理的解釋?zhuān)ㄔ噭┖泻细袂艺?,操作過(guò)程規(guī)范且準(zhǔn)確):
甲樣本中的新冠病毒含量更高達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
甲樣本中的新冠病毒含量更高達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶;熱穩(wěn)定性DNA聚合酶(Taq酶);4;4、1;不能;兩段引物的堿基序列沒(méi)有相關(guān)性(既不相同,也不互補(bǔ));試劑盒中的原料、引物和探針數(shù)量一定,超出一定的循環(huán)數(shù)后,熒光標(biāo)記的“雜交雙鏈”不再增加;陽(yáng);甲樣本中的新冠病毒含量更高達(dá)到閾值所需的循環(huán)數(shù)更少
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:53引用:3難度:0.7
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    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:7引用:2難度:0.6
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    (1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
     
    (填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”)??衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體,常用
     
    將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞,還需用到植物細(xì)胞工程中的
     
    技術(shù),才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
    (2)PCR過(guò)程所依據(jù)的原理是
     
    。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增,若將一個(gè)目的基因復(fù)制10次,則需要在緩沖液中至少加入
     
    個(gè)引物。
    (3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過(guò)程稱(chēng)為
     
    。科研人員通過(guò)實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大,可能的原因是
     

    (4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長(zhǎng)激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯(cuò)誤的是
     
    。
    A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
    B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測(cè)外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
    C.人的生長(zhǎng)激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說(shuō)明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
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    發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6
  • 3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說(shuō)法錯(cuò)誤的是(  )

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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