玉米是重要的糧食作物,其葉片細胞中的P蛋白是一種水通道蛋白,由P基因編碼,在植物生長發(fā)育過程中對水分的吸收具有重要的調(diào)節(jié)功能。為了探究P蛋白的超量表達對玉米生長的影響,科研人員進行了超量表達P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的生理特性等研究。
(1)超量表達P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的獲得
①利用PCR技術(shù)以圖1中的DNA片段為模板擴增P基因,需要的引物有B、CB、C(從A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選擇)。上述過程中,至少經(jīng)過33次循環(huán)后會產(chǎn)生雙鏈等長的P基因片段,循環(huán)4次共需要的引物數(shù)為3030。
②在超量表達P基因載體的構(gòu)建中,所用DNA片段和Ti質(zhì)粒的酶切位點(注:三種限制酶切割后形成的黏性末端各不相同)如圖2所示,為使P基因在玉米植株中超量表達,應(yīng)優(yōu)先選用BamHⅠ和EcoRⅠBamHⅠ和EcoRⅠ酶組合將DNA片段和Ti質(zhì)粒切開后構(gòu)建重組表達載體。強啟動子的基本組成單位是脫氧核糖核苷酸脫氧核糖核苷酸。
③將農(nóng)桿菌浸泡過的玉米愈傷組織進行植物組織培養(yǎng),培養(yǎng)基中需加入潮霉素潮霉素進行篩選,篩選出的愈傷組織經(jīng)再分化再分化形成叢芽,最終獲得超量表達P蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米株系a。
(2)超量表達P蛋白轉(zhuǎn)基因玉米的生理特性研究
選取長勢相同且生長狀況良好的野生型玉米和a株系玉米,干旱處理15天,測量植株水分散失率如圖3;并在不同CO2濃度下測量地上部分鮮重,獲得相對生物量如圖4所示。
可見干旱條件下,與野生型玉米相比,a株系玉米超量表達P蛋白,使植株對水分和CO2水分和CO2的利用率更高,光合效率更高。
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】B、C;3;30;BamHⅠ和EcoRⅠ;脫氧核糖核苷酸;潮霉素;再分化;水分和CO2
【解答】
【點評】
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