人體肝臟細胞中的乙醛脫氫酶2（ALDH2）是人體酒精代謝中的關鍵酶。如圖表示利用基因工程生產ALDH2過程中使用的質粒及目的基因的部分結構，β-半乳糖苷酶能分解無色的X-gal產生藍色物質。圖中氨芐青霉素抗性基因、β-半乳糖苷酶基因、目的基因的序列中分別含有1種、5種、2種限制酶的識別序列及切割位點。
（1）構建基因表達載體時一般至少需要兩種限制酶，以防止 質?；蚰康幕蜃陨憝h(huán)化質?；蚰康幕蜃陨憝h(huán)化和 目的基因與質粒反向連接目的基因與質粒反向連接。設計啟動子的作用是 使目的基因正常轉錄（表達）使目的基因正常轉錄（表達）。
（2）為了使目的基因與載體能正確連接，應在擴增的目的基因A、B兩端分別引入 XhoⅠXhoⅠ和 MunⅠMunⅠ兩種不同限制酶的識別序列。
（3）MunⅠ酶切后的末端與EcoRⅠ酶切后的末端能連接，原因是 MunⅠ酶與EcoRI酶切后的黏性末端相同（可以互補配對）MunⅠ酶與EcoRI酶切后的黏性末端相同（可以互補配對）。
（4）以大腸桿菌為受體細胞，在篩選插入ALDH2基因成功的受體細胞時，除營養(yǎng)物質外，還要在培養(yǎng)基中加入的物質有 氨芐青霉素和X-gal氨芐青霉素和X-gal。
（5）研究發(fā)現如果將ALDH2的第36位的氨基酸替換，可提高其催化效率。請寫出通過蛋白質工程技術獲取高效ALDH2基因的操作流程：從預期的蛋白質功能（高效ALDH2）出發(fā)→設計預期的蛋白質結構（高效ALDH2結構）→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列從預期的蛋白質功能（高效ALDH2）出發(fā)→設計預期的蛋白質結構（高效ALDH2結構）→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】質?；蚰康幕蜃陨憝h(huán)化；目的基因與質粒反向連接；使目的基因正常轉錄（表達）；XhoⅠ；MunⅠ；MunⅠ酶與EcoRI酶切后的黏性末端相同（可以互補配對）；氨芐青霉素和X-gal；從預期的蛋白質功能（高效ALDH2）出發(fā)→設計預期的蛋白質結構（高效ALDH2結構）→推測應有的氨基酸序列→找到相對應的脫氧核苷酸序列
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/12/7 0:0:1組卷：8難度：0.5
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
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2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ）
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6