人乳頭瘤病毒（簡稱HPV，遺傳物質(zhì)為DNA）感染是引發(fā)宮頸癌的最主要因素。我國研制的HPV疫苗和抗L1蛋白單克隆抗體對宮頸癌的預防有良好的效果，已知L1蛋白是HPV表面的一種主要蛋白質(zhì)。根據(jù)所學知識，回答下列問題。
（1）用基因工程制備HPV疫苗，首先可以通過PCR擴增目的基因。PCR利用了 DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制的原理，前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根據(jù)這一序列合成 引物引物。
（2）基因工程操作的核心步驟是 基因表達載體的構(gòu)建基因表達載體的構(gòu)建，此步驟需要在適宜的溫度下進行，主要原因是 此過程用到的限制酶、DNA連接酶需要適宜的溫度此過程用到的限制酶、DNA連接酶需要適宜的溫度。
（3）在制備抗L1蛋白單克隆抗體時，需要將小鼠B淋巴細胞與鼠的骨髓瘤細胞融合，再用特定的培養(yǎng)基進行篩選。在該培養(yǎng)基上，未融合的細胞和 融合的具有同種核的細胞融合的具有同種核的細胞都會死亡，只有融合的雜交瘤細胞能正常生長。上述獲得的雜交瘤細胞不能直接用來制備抗L1蛋白單克隆抗體，需要再次對細胞進行篩選，原因是 B淋巴細胞有多種，因此獲得的雜交瘤細胞也有多種，需要再次篩選B淋巴細胞有多種，因此獲得的雜交瘤細胞也有多種，需要再次篩選。
（4）抗L1蛋白單克隆抗體主要的優(yōu)點是 特異性強、靈敏度高，可大量制備特異性強、靈敏度高，可大量制備，可以特異性地和結(jié)合，精準診斷測試者是否感染HPV。
【考點】基因工程的操作過程綜合；單克隆抗體及其應用．
【答案】DNA雙鏈復制；引物；基因表達載體的構(gòu)建；此過程用到的限制酶、DNA連接酶需要適宜的溫度；融合的具有同種核的細胞；B淋巴細胞有多種，因此獲得的雜交瘤細胞也有多種，需要再次篩選；特異性強、靈敏度高，可大量制備
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：5引用：2難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得。基因文庫包括和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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