人促紅細胞生成素（EPO）是一種可用于治療腎性貧血的糖蛋白類激素，可用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)EPO。科研人員利用大鼠乳清酸蛋白（WAP）基因上游的調(diào)控序列及啟動子和3′UTR序列構(gòu)建了基因表達載體。構(gòu)建前，科研人員擴增了WAP基因上游不同長度的片段，將這些片段分別插入EPO基因中，以確定WAP基因啟動子的具體位置。相關(guān)信息如圖所示。
（1）為將擴增后的產(chǎn)物定向插入到基因表達載體中，以指導(dǎo)EPO基因的表達，需要在引物末端添加特定的限制酶識別序列。由圖中信息可知，在P1～P4末端添加的序列所對應(yīng)的限制酶是 ClaⅠClaⅠ，在A末端添加的序列所對應(yīng)的限制酶是 MunIMunI。
（2）將通過PCR處理后的含不同長度的WAP基因上游序列與EPO基因連接，構(gòu)建成表達載體的過程中，需要 44種限制酶切割上述DNA片段。檢測轉(zhuǎn)基因雌性大鼠時發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)入含P1～P3與A擴增產(chǎn)物的個體乳汁中有EPO，而含P4與A擴增產(chǎn)物的個體沒有EPO生成。含P4與A擴增產(chǎn)物的個體沒有EPO生成的原因是 P4與A擴增產(chǎn)物不含完整的WAP基因的啟動子，EPO基因不表達P4與A擴增產(chǎn)物不含完整的WAP基因的啟動子，EPO基因不表達。
（3）該實驗中，在EPO基因上游插入大鼠WAP基因啟動子的理由是 能使EPO基因在大鼠的乳腺細胞中特異性表達能使EPO基因在大鼠的乳腺細胞中特異性表達。
（4）科研人員不選用大腸桿菌作為該實驗的受體細胞，從基因表達的角度分析，其原因是 EPO基因是真核生物的基因，該基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA無法在大腸桿菌細胞內(nèi)加工成熟，表達出來的產(chǎn)物不是EPOEPO基因是真核生物的基因，該基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA無法在大腸桿菌細胞內(nèi)加工成熟，表達出來的產(chǎn)物不是EPO。
【答案】ClaⅠ；MunI；4；P4與A擴增產(chǎn)物不含完整的WAP基因的啟動子，EPO基因不表達；能使EPO基因在大鼠的乳腺細胞中特異性表達；EPO基因是真核生物的基因，該基因轉(zhuǎn)錄出的mRNA無法在大腸桿菌細胞內(nèi)加工成熟，表達出來的產(chǎn)物不是EPO
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/3 8:0:9組卷：17引用：2難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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