大麗輪枝菌（一種絲狀真菌）是引起棉花黃萎病的主要病原菌。為觀察大麗輪枝菌對(duì)棉花根侵染路徑，研究人員利用綠色熒光蛋白基因（sGFP）轉(zhuǎn)染大麗輪枝菌，培育出表達(dá)綠色熒光蛋白的轉(zhuǎn)基因菌株，主要過程如圖（圖中a鏈和b鏈分別是相應(yīng)基因轉(zhuǎn)錄模板鏈）。分析回答：
（1）過程①中，PCR擴(kuò)增sGFP的原理是
雙鏈DNA復(fù)制
雙鏈DNA復(fù)制
，該過程除需要根據(jù)sGFP兩端（3′端）核苷酸（或堿基）序列
sGFP兩端（3′端）核苷酸（或堿基）序列
設(shè)計(jì)特異性引物序列外，為保證sCFP正確插入到質(zhì)粒中，還需要在引物的5ˊ端添加限制酶識(shí)別序列，圖中b鏈的黏性末端堿基序列（5ˊ→3ˊ）為AGCT
AGCT
。
（2）過程①中，若1個(gè)sGFP片段連續(xù)擴(kuò)增4次，則會(huì)形成8
8
個(gè)兩條鏈等長(zhǎng)的sGFP片段。
（3）過程②需要的工具酶是DNA連接酶
DNA連接酶
。研究中將sGFP插入到構(gòu)巢曲霉啟動(dòng)子和終止子之間的目的是保證sGFP能在大麗輪枝菌細(xì)胞中表達(dá)
保證sGFP能在大麗輪枝菌細(xì)胞中表達(dá)
。
（4）過程③中需要配制細(xì)菌培養(yǎng)基，配制時(shí)要在培養(yǎng)基滅菌并冷卻到80℃左右后，加入用無菌水
無菌水
配制的適宜濃度的潮霉素溶液，潮霉素不能與培養(yǎng)基一同滅菌的原因是潮霉素在滅菌時(shí)結(jié)構(gòu)被破壞
潮霉素在滅菌時(shí)結(jié)構(gòu)被破壞
。
（5）選擇過程③篩選培養(yǎng)得到的不同農(nóng)桿菌菌落，分別提取細(xì)菌質(zhì)粒DNA，并用BamHI和HindIII完全酶切后電泳，請(qǐng)?jiān)诖痤}紙相應(yīng)位置畫出可能得到的電泳條帶。
（6）將導(dǎo)入重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌加入大麗輪枝菌的孢子細(xì)胞懸液中，在適宜條件完成轉(zhuǎn)染后利用濾膜過濾得到孢子細(xì)胞，再在真菌培養(yǎng)基上培養(yǎng)獲得菌落，最終通過檢測(cè)大麗輪枝菌菌絲細(xì)胞中綠色熒光強(qiáng)度
大麗輪枝菌菌絲細(xì)胞中綠色熒光強(qiáng)度
篩選出綠色熒光蛋白旺盛表達(dá)的大麗輪枝菌。
