孔雀石綠（簡(jiǎn)稱MG）是廣泛使用的有機(jī)染料，在自然環(huán)境中極難降解，容易引起土壤污染，進(jìn)而危害人體健康。因此從土壤中分離和篩選出高效的MG降解菌有非常重要的意義。已知MG在水中溶解度低，含過(guò)量MG的固體培養(yǎng)基不透明。
（1）培養(yǎng)基的配制：MG降解菌富集培養(yǎng)基需含有NaH2PO4、KH2PO4、NaCl、NH4Cl、CaCl2、MgSO4、水等，再加 孔雀石綠（MG）孔雀石綠（MG）作為唯一碳源。培養(yǎng)基配制好后，需用 濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）法進(jìn)行滅菌。
（2）MG高效降解菌株的富集：如圖所示，將1.0g土樣接入含上述配制好的培養(yǎng)液的三角瓶中，將三角瓶置于30℃、180r/min搖床中振蕩培養(yǎng)1～2天，振蕩培養(yǎng)的目的是 使目的菌充分接觸培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，增大培養(yǎng)基中O2含量使目的菌充分接觸培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，增大培養(yǎng)基中O2含量，直至培養(yǎng)液變渾濁后，換瓶重復(fù)操作2～3次，以達(dá)到富集的目的。
（3）MG高效降解菌株的分離和純化：圖中所示的分離純化細(xì)菌的方法是 稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法。實(shí)驗(yàn)中在對(duì)應(yīng)稀釋倍數(shù)為106的培養(yǎng)基中，取0.2ml稀釋液涂布，得到以下統(tǒng)計(jì)結(jié)果；涂布了三個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)是210、240和246；請(qǐng)計(jì)算每毫升原液中的菌體數(shù)是 1.16×1091.16×109。用這種方法測(cè)得的菌體數(shù)比實(shí)際活菌數(shù)量 少少。
（4）MG高效降解菌株的鑒定：將純化獲得的菌種接種于含過(guò)量MG的固體培養(yǎng)基（其他營(yíng)養(yǎng)成分等適宜）上，根據(jù)培養(yǎng)基是否出現(xiàn) 透明圈透明圈，就可以鑒別出目的菌株，原因是 目的菌株通過(guò)降解MG生長(zhǎng)，使菌落周圍的培養(yǎng)基變透明，出現(xiàn)透明圈目的菌株通過(guò)降解MG生長(zhǎng)，使菌落周圍的培養(yǎng)基變透明，出現(xiàn)透明圈。
【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）；微生物的數(shù)量測(cè)定．
【答案】孔雀石綠（MG）；濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）；使目的菌充分接觸培養(yǎng)液中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，增大培養(yǎng)基中O2含量；稀釋涂布平板法；1.16×109；少；透明圈；目的菌株通過(guò)降解MG生長(zhǎng)，使菌落周圍的培養(yǎng)基變透明，出現(xiàn)透明圈
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：7引用：2難度：0.6
相似題
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1．回答下列關(guān)于微生物的問(wèn)題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過(guò)程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測(cè)為真菌，則其特征中，最能說(shuō)明SM01是真菌的是有細(xì)胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細(xì)胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對(duì)SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測(cè)定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對(duì)不選用的其他培養(yǎng)液，分別說(shuō)明原因：
①缺少，SM01不能很好生長(zhǎng)
②具有，會(huì)影響對(duì)SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測(cè)定結(jié)果
③缺乏，會(huì)影響SM01的生長(zhǎng)，也無(wú)法對(duì)阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測(cè)定．
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
2．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長(zhǎng)。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對(duì)其計(jì)數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯(cuò)誤的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問(wèn)題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌，并了解其生長(zhǎng)規(guī)律，進(jìn)行了如下操作．請(qǐng)回答下列問(wèn)題：
（1）采樣與細(xì)菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌，可以通過(guò)增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細(xì)菌：將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無(wú)菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長(zhǎng)出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長(zhǎng)通SO2的時(shí)間，同時(shí)逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細(xì)菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來(lái)說(shuō)，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間），馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體．
（4）探究生長(zhǎng)規(guī)律：在計(jì)數(shù)時(shí)，計(jì)數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計(jì)數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長(zhǎng)的一個(gè)菌落來(lái)源于樣品稀釋液中的；通過(guò)統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測(cè)出樣品中大約含有多少活菌，通常推測(cè)統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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