去年年初,國內(nèi)牛奶制品因為牧草進口成本上漲而漲價的現(xiàn)象引起了人們的關(guān)注。紫花苜蓿是一種重要的牧草,某研究團隊擬將耐鹽基因HLAl導(dǎo)入紫花苜蓿中培育耐鹽牧草,具體實驗流程如圖甲,圖乙是載體pCHLAl中T-DNA示意圖。回答下列問題:
(1)過程②為
基因表達載體
基因表達載體
的構(gòu)建,是基因工程的核心,此過程需要使用的酶是 限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)和DNA連接酶
限制性核酸內(nèi)切酶(或限制酶)和DNA連接酶
。
(2)過程③常用的轉(zhuǎn)化方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法
,轉(zhuǎn)化是指 目的基因進入受體細(xì)胞內(nèi)并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程
目的基因進入受體細(xì)胞內(nèi)并且在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程
。
(3)已知Basta是一種除草劑,則為達到培養(yǎng)并篩選的目的,過程④的培養(yǎng)基所含的成分必須有無機營養(yǎng)、有機營養(yǎng)、植物激素、Basta(必須同時回答到這兩種成分)
植物激素、Basta(必須同時回答到這兩種成分)
。
(4)過程④得到的幼苗 不一定
不一定
(填“一定”或“一定不”或“不一定”)含有HLAl基因,為進一步確認(rèn),可用PCR擴增的方法進行鑒定,則進行PCR反應(yīng)的引物應(yīng)根據(jù) HLA1基因序列
HLA1基因序列
設(shè)計,PCR的原理是 DNA雙鏈復(fù)制
DNA雙鏈復(fù)制
。
(5)要檢測目的基因是否插入到苜蓿細(xì)胞的染色體DNA上,可采用 DNA分子雜交
DNA分子雜交
技術(shù)。
(6)判斷本實驗的目的是否表達成功,還應(yīng)進行 耐鹽檢測(或鑒定)
耐鹽檢測(或鑒定)
實驗。