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tPA是一種臨床上用于治療心腦血栓類疾病的藥物,科研人員計(jì)劃用動物乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)tPA,但tPA并不是乳腺蛋白,因此在動物乳腺中的表達(dá)水平較低。生長激素(GH)可促進(jìn)動物細(xì)胞增殖和乳腺生長發(fā)育及維持泌乳。研究人員通過構(gòu)建具有GH基因和IPA基因的雙轉(zhuǎn)基因小鼠,探究GH能否促進(jìn)外源目的基因tPA的表達(dá)。回答下列問題:
(1)為獲得轉(zhuǎn)基因小鼠,將tPA基因通過
顯微注射
顯微注射
的方法注入小鼠的
受精卵
受精卵
中,將發(fā)育成為tPA單轉(zhuǎn)基因個(gè)體;同理將tPA基因和GH基因同時(shí)注入獲得雙轉(zhuǎn)基因小鼠,選擇性別為
雌性
雌性
的個(gè)體作為后續(xù)研究對象。
(2)剪取轉(zhuǎn)基因小鼠的少量尾尖組織,提取基因組DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增,PCR反應(yīng)體系中需加入特定的引物,引物的作用是
使耐高溫的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)從引物3'端開始連接脫氧核苷酸
使耐高溫的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)從引物3'端開始連接脫氧核苷酸
,擴(kuò)增的產(chǎn)物再經(jīng)過
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
技術(shù)來鑒定是否成功。
(3)圖1是兩種基因表達(dá)載體的部分示意圖,圖中CMV代表
乳腺中特異表達(dá)的基因
乳腺中特異表達(dá)的基因
的啟動子。利用PCR技術(shù)來檢測基因整合情況,若小鼠成功整合了tPA基因,則能擴(kuò)增出多個(gè)大小為
560
560
bp的DNA片段。圖2中的1和2代表轉(zhuǎn)基因小鼠的兩種檢測結(jié)果,出現(xiàn)第
2
2
種結(jié)果的小鼠為GH/tPA雙轉(zhuǎn)基因小鼠。

(4)選取處于泌乳期的GH/tPA雙轉(zhuǎn)基因和tPA單轉(zhuǎn)基因小鼠,統(tǒng)計(jì)分析兩種轉(zhuǎn)基因小鼠乳腺中tPA的表達(dá)情況,結(jié)果見下表。結(jié)果證明了
生長激素(GH)能夠促進(jìn)tPA的表達(dá)
生長激素(GH)能夠促進(jìn)tPA的表達(dá)
。
轉(zhuǎn)基因小鼠tPA表達(dá)情況分析表
tPA單轉(zhuǎn)基因小鼠 GH/tPA雙轉(zhuǎn)基因小鼠
表達(dá)水平(μg/mL) 16.3~82.5 112~423

【答案】顯微注射;受精卵;雌性;使耐高溫的DNA聚合酶(TaqDNA聚合酶)從引物3'端開始連接脫氧核苷酸;瓊脂糖凝膠電泳;乳腺中特異表達(dá)的基因;560;2;生長激素(GH)能夠促進(jìn)tPA的表達(dá)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/7/17 8:0:9組卷:4引用:2難度:0.6
相似題
  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí),使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的
     

    (3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí),DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     
    。
    (4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     
    。
    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     
    。

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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