重組PCR技術是一項新的PCR技術,通過重組PCR技術能將兩個不同的DNA連接成為一個新DNA分子。某科研小組從豬源大腸桿菌中擴增得到LTB和ST1兩個基因片段,利用重組PCR技術構建了LTB-ST1融合基因,制備過程如圖所示?;卮鹣铝袉栴}:

(1)利用PCR技術擴增目的基因的過程中,向反應體系中加入的物質除了引物和模板鏈外,還需要加入 耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸(或Taq酶和dNTP)耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸(或Taq酶和dNTP)。利用PCR技術擴增目的基因,依據(jù)的生物學原理是 DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制。
(2)從P2,P3兩種引物的角度分析,LTB和ST1基因能夠融合的關鍵是 這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對,PCR1和PCR2不能在同一個反應體系中進行,原因是 P2和P3能結合,會干擾引物和模板鏈的結合,影響PCR過程P2和P3能結合,會干擾引物和模板鏈的結合,影響PCR過程。
(3)②過程 不需要不需要(填“需要”或“不需要”)加入引物,原因是 兩條母鏈可作為合成子鏈的引物兩條母鏈可作為合成子鏈的引物。
(4)科研小組為了檢測是否成功構建出融合基因,將反應后體系中的各種DNA分子進行電泳,結果如圖所示。則融合基因最可能是 33。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】耐高溫的DNA聚合酶和4種脫氧核苷酸(或Taq酶和dNTP);DNA雙鏈復制;這兩種引物的部分區(qū)域能進行堿基互補配對;P2和P3能結合,會干擾引物和模板鏈的結合,影響PCR過程;不需要;兩條母鏈可作為合成子鏈的引物;3
【解答】
【點評】
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