人心肌細胞中的肌鈣蛋白由三種結構不同的亞基組成,即肌鈣蛋白T(cTnT)、肌鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白C(cTnC),其中cTnI在血液中含量上升是心肌損傷的特異性指標。為制備抗cTnI的單克隆抗體,科研人員完成了以下過程。請回答相關問題:
(1)動物細胞培養(yǎng)時,可以用 胰蛋白酶(膠原蛋白酶)胰蛋白酶(膠原蛋白酶)酶處理動物組織,得到分散的組織細胞,培養(yǎng)基除了添加葡萄糖、氨基酸、生長因子等必要的營養(yǎng)成分外,往往還需加入一定量的 動物血清動物血清,以滿足動物細胞培養(yǎng)的營養(yǎng)需要。動物細胞培養(yǎng)應在含5% CO2的恒溫培養(yǎng)箱中進行,CO2的作用是 維持培養(yǎng)液的pH維持培養(yǎng)液的pH。
(2)為了刺激小鼠機體產生更多的B淋巴細胞,每隔2周用cTnI作為 抗原抗原注射小鼠1次,共注射3次。最后一次免疫后第3天,取脾臟內部分組織制成細胞懸液與骨髓瘤細胞誘導融合,常用的化學誘導劑是 聚乙二醇 (PEG)聚乙二醇 (PEG)。為了獲得雜交瘤細胞,應將甲放在 (HAT)選擇性(HAT)選擇性培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。②過程表示將乙細胞接種到多孔培養(yǎng)板上,進行 抗體抗體檢測,之后稀釋、培養(yǎng)、再檢測,并多次重復上述操作,其目的是篩選獲得抗cTnI抗體產量大、純度高的雜交瘤細胞丙。通過該技術獲得的單抗特點是 特異性強、靈敏度高特異性強、靈敏度高。
(3)酶聯免疫吸附雙抗體夾心法是醫(yī)學上常用的定量檢測抗原的方法,具體原理如圖2示:
據圖分析,固相抗體和酶標抗體均能與同一抗原結合,這是由于不同抗體能與同一抗原表面的不同部位結合。該檢測方法中,酶標抗體的作用是 與待測抗原結合,酶催化底物水解與待測抗原結合,酶催化底物水解。
【答案】胰蛋白酶(膠原蛋白酶);動物血清;維持培養(yǎng)液的pH;抗原;聚乙二醇 (PEG);(HAT)選擇性;抗體;特異性強、靈敏度高;與待測抗原結合,酶催化底物水解
【解答】
【點評】
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