人血清白蛋白（HSA） 具有重要的醫(yī)用價值。如圖是以基因工程技術(shù)獲取HSA的兩條途徑。其中報告基因表達(dá)的產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍(lán)色?；卮鹣铝袉栴}。
（1）基因工程中可通過PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因，生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時。解開DNA雙鏈的酶是解旋酶解旋酶；在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是加熱至90～95℃加熱至90～95℃，上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA分子雙鏈間的氫鍵氫鍵。
（2）已知堿性磷酸酶能除去核苷酸末端的5'磷酸，構(gòu)建表達(dá)載體的過程中用該酶處理Ti質(zhì)粒，但HSA基因不用堿性磷酸處理，這樣做的目的是防止Ti質(zhì)粒發(fā)生自身連接防止Ti質(zhì)粒發(fā)生自身連接，經(jīng)過上述處理后的Ti質(zhì)粒在DNA連接酶的作用下可與HSA基因之間形成22個磷酸二酯鍵，再經(jīng)相關(guān)處理獲得結(jié)構(gòu)完整的重組DNA分子。
（3）過程①中需將植物細(xì)胞與農(nóng)桿菌混合后共同培養(yǎng)后。還須轉(zhuǎn)接到含無色物質(zhì)K無色物質(zhì)K的培養(yǎng)基上篩選出轉(zhuǎn)化的植物細(xì)胞。③過程中將目的基因?qū)刖d羊受體細(xì)胞。采用最多，也是最為有效的方法是顯微注射技術(shù)顯微注射技術(shù)。還可以使用動物病毒作為載體，實(shí)現(xiàn)轉(zhuǎn)化。
（4）為檢測HSA基因的表達(dá)情況，可提取受體細(xì)胞的蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)，用抗血清白蛋白的抗體進(jìn)行雜交實(shí)驗(yàn)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】解旋酶；加熱至90～95℃；氫鍵；防止Ti質(zhì)粒發(fā)生自身連接；2；無色物質(zhì)K；顯微注射技術(shù)；蛋白質(zhì)
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：15引用：1難度：0.7
相似題
-
1．基因工程技術(shù)又稱為DNA重組技術(shù)，回答相關(guān)問題：
（1）在基因工程中，獲取目的基因主要有兩大途徑，即和從中分離．
（2）利用某植物的成熟葉片為材料，同時構(gòu)建cDNA文庫和基因組文庫，兩個文庫相比，cDNA文庫中含有的基因數(shù)目比基因組文庫中的少，其原因是．
（3）在基因表達(dá)載體中，啟動子是聚合酶識別并結(jié)合的部位．若采用原核生物作為基因表達(dá)載體的受體細(xì)胞，最常用的原核生物是．
（4）將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞時，采用最多的方法是法．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：2引用：1難度：0.3 -
2．科研人員利用大腸桿菌構(gòu)建了抗蟲基因文庫。最新研究發(fā)現(xiàn)漏斗蜘蛛中的AH基因控制合成的毒素肽具有顯著的殺蟲效果，現(xiàn)以p-B質(zhì)粒為載體，構(gòu)建 AH基因的cDNA文庫。圖1表示p-B質(zhì)粒，其中Cm/表示氯霉素抗性基因，cdB 基因表達(dá)產(chǎn)物能抑制大腸桿菌 DNA 復(fù)制。圖中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)，且不同種限制酶識別序列不同，其中AiuI、XbaI、SspI和MfeⅠ識別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別是 AG'CT、T'CTAGA、AAT'ATT、C'AATTG。請分析并回答下列問題：
（1）為獲得AH基因的cDNA，先要從漏斗蜘蛛毒素肽分泌細(xì)胞中提取，再通過合成出AH基因的cDNA。若從漏斗蜘蛛其他組織細(xì)胞提取，則難以成功，原因是。
（2）若已知AH基因的cDNA兩端部分序列為：5'-AACTATGCGC……CGTAGCCTCT-3'，請寫出PCR擴(kuò)增該cDNA時的兩個引物對應(yīng)的局部序列（前10個堿基序列），并標(biāo)明5'和3'端：，。一個初始雙鏈cDNA經(jīng)四輪循環(huán)后，共消耗這兩種引物的數(shù)量為個。
（3）利用圖中的質(zhì)粒和AH基因構(gòu)建重組質(zhì)粒時，宜選用限制酶雙酶切質(zhì)粒，再選用限制酶切割目的基因，將切割后獲得的DNA片段混合，經(jīng)DNA連接酶處理后，再與大腸桿菌混合培養(yǎng)，在含有適量氯霉素的培養(yǎng)基中添加適量冷的，以促進(jìn)轉(zhuǎn)化。
（4）經(jīng)上述處理培養(yǎng)后，其中能繁殖的大腸桿菌中應(yīng)含有的質(zhì)粒是，原因是。發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：8引用：1難度：0.6 -
3．基因治療是指將外源正?；?qū)氚屑?xì)胞，以糾正或補(bǔ)償因基因缺陷和異常引起的疾病，以達(dá)到治療的目的．干擾素基因缺失的小鼠不能產(chǎn)生成熟淋巴細(xì)胞，科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對干擾素基因缺失的小鼠進(jìn)行了基因治療．請回答：
（1）為使干擾素基因在小鼠細(xì)胞中高效表達(dá)，需要把來自cDNA文庫的干擾素基因片段正確插入基因表達(dá)載體的和之間．
（2）將干擾素基因?qū)隕S細(xì)胞的方法是，采用可以鑒定目的基因是否插入到受體細(xì)胞染色體DNA分子上，再將能正常表達(dá)干擾素的細(xì)胞轉(zhuǎn)入到小鼠體內(nèi)，這種治療方法稱為．導(dǎo)入ES細(xì)胞而不是導(dǎo)入上皮細(xì)胞是因?yàn)镋S細(xì)胞在功能上具有．
（3）干擾素基因缺失的小鼠易患某種細(xì)菌導(dǎo)致的肺炎，引起這種現(xiàn)象的原因是小鼠缺少成熟的淋巴細(xì)胞，降低了小鼠免疫系統(tǒng)的功能．
（4）用于基因治療的基因有三類，一類是把正常基因?qū)胗谢蛉毕莸募?xì)胞中，以表達(dá)出正常性狀來治療，第二類是反義基因，即通過產(chǎn)生的mRNA分子與病變基因產(chǎn)生的進(jìn)行互補(bǔ)結(jié)合，來阻斷非正常蛋白質(zhì)的合成；第三類是編碼可以殺死癌細(xì)胞的蛋白酶基因．發(fā)布：2024/12/29 8:0:2組卷：24引用：2難度：0.5
把好題分享給你的好友吧~~