諾如病毒是一類引起急性非細(xì)菌性胃腸炎的RNA病毒，它的主要結(jié)構(gòu)蛋白的P區(qū)域包含受體結(jié)合區(qū)和主要抗原位點(diǎn)。通過大腸桿菌表達(dá)P區(qū)域可形成P顆粒，P顆粒的抗原性及受體結(jié)合功能與天然病毒極為相似，可以用于制備快速檢測(cè)諾如病毒的單克隆抗體，基本過程如下：
（1）獲取P顆?；颍禾崛≈Z如病毒的RNA，以相應(yīng)的RNA片段為模板，利用 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄酶合成cDNA。再以cDNA為模板進(jìn)行PCR擴(kuò)增，從而快速獲得大量P顆?；?。
（2）形成重組DNA分子：該過程常用不同的限制性核酸內(nèi)切酶切割目的基因和質(zhì)粒，目的是防止目的基因和載體的自身環(huán)化及 （目的基因與載體的）反向連接（目的基因與載體的）反向連接。
（3）重組DNMA分子導(dǎo)入受體細(xì)胞及篩選：用 CaCl2CaCl2處理大腸桿菌，可提高轉(zhuǎn)化效率，重組質(zhì)粒通常需具有目的基因、復(fù)制起點(diǎn)、轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)、轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)（終止子）轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)（終止子）及標(biāo)記基因等功能序列，從而保證其正常復(fù)制、表達(dá)及便于后續(xù)篩選。
（4）P顆粒基因的表達(dá)：篩選過的大腸桿菌表達(dá)P顆?；颍蛛x提取P顆粒。
（5）單克隆抗體的制備與檢測(cè)：將P顆粒注射到小鼠體內(nèi)，取免疫小鼠的脾細(xì)胞與小鼠骨髓瘤通過化學(xué)物質(zhì) 聚乙二醇（PEG）聚乙二醇（PEG）誘導(dǎo)細(xì)胞融合。接著進(jìn)行兩次篩選，第一次篩選出雜交瘤細(xì)胞：第二次篩選出 產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。單克隆抗體可用于診斷是否感染諾如病毒，這種診斷運(yùn)用了 抗原-抗體抗原-抗體雜交技術(shù)，單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn)是 特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備。
【考點(diǎn)】單克隆抗體及其應(yīng)用．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；（目的基因與載體的）反向連接；CaCl2；轉(zhuǎn)錄終止位點(diǎn)（終止子）；聚乙二醇（PEG）；產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞；抗原-抗體；特異性強(qiáng)，靈敏度高，并可大量制備
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：5引用：1難度：0.7
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1．CD47是一種跨膜糖蛋白，它可與巨噬細(xì)胞表面的信號(hào)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合，從而抑制巨噬細(xì)胞的吞噬作用。肺癌、結(jié)腸癌等多種腫瘤細(xì)胞表面的CD47含量比正常細(xì)胞高1.6～5倍，導(dǎo)致吞噬細(xì)胞對(duì)腫瘤細(xì)胞的清除效果減弱?？茖W(xué)家推測(cè)，抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對(duì)巨噬細(xì)胞的抑制作用，為此他們按照如圖流程進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)。下列敘述正確的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：7引用：3難度：0.6 -
2．雙特異性抗體是指一個(gè)抗體分子可以與兩個(gè)不同抗原或同一抗原的兩個(gè)不同抗原表位相結(jié)合，目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長(zhǎng)春花是原產(chǎn)于非洲東海岸的野生花卉，其所含的長(zhǎng)春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細(xì)胞技術(shù)（免疫的B淋巴細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞雜交技術(shù)）生產(chǎn)能同時(shí)識(shí)別癌胚抗原和長(zhǎng)春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請(qǐng)分析回答下列問題：
（1）與植物體細(xì)胞雜交相比，圖2中過程②特有的誘導(dǎo)融合的方法是，過程②選用的骨髓瘤細(xì)胞（選填“能”或“不能”）在HAT培養(yǎng)基上生長(zhǎng)。
（2）對(duì)③篩選出的雜交瘤細(xì)胞，還需進(jìn)行和，才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比，單克隆抗體最主要的優(yōu)點(diǎn)是（答出一點(diǎn)）。
（3）圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是。圖2方框內(nèi)需要經(jīng)過次篩選，才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞。體外培養(yǎng)到一定時(shí)期的單克隆雜交—雜交瘤細(xì)胞會(huì)因?yàn)?、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)缺乏等因素而分裂受阻，需進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
（4）與直接使用長(zhǎng)春堿相比，將長(zhǎng)春堿與雙特異性單克隆抗體結(jié)合后給藥，對(duì)人體的副作用更小，原因是。發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：21引用：4難度：0.5 -
3．使用高效的細(xì)胞毒素藥物進(jìn)行化療可以有效殺傷腫瘤細(xì)胞但細(xì)胞毒素沒有特異性，在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí)還會(huì)對(duì)健康細(xì)胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應(yīng)用?？贵w一藥物偶聯(lián)物（ADC）通過將細(xì)胞毒素與能特異性識(shí)別腫瘤抗原的單克隆抗體結(jié)合，實(shí)現(xiàn)了對(duì)腫瘤細(xì)胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物（如細(xì)胞毒素）三部分組成，它的作用機(jī)制如圖所示。下列敘述正確的是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 3:30:1組卷：18引用：2難度：0.7
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