小白鼠因其具有容易飼養(yǎng)，繁殖率高，遺傳上有較高的純合度，代謝類型、生理病理特征與人類接近，全基因序列和人類高度相似，染色體數(shù)與人類非常接近等系列特征而成為人類實(shí)驗(yàn)研究的重要對(duì)象。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球每年有超過(guò)1億的小白鼠被用來(lái)當(dāng)作實(shí)驗(yàn)樣本，它們可以說(shuō)為人類醫(yī)學(xué)作出了巨大的貢獻(xiàn)。如圖1是科研人員利用小白鼠單倍體ES細(xì)胞（只有一個(gè)染色體組），成功培育出轉(zhuǎn)基因小鼠的主要技術(shù)流程，請(qǐng)分析回答下列問(wèn)題：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四種限制酶。箭頭指向的位置為限制酶的切割位點(diǎn)：Amp′是氨芐青霉素抗性基因，Neo′是G418抗性基因。
（1）利用PCR技術(shù)可以獲取和擴(kuò)增目的基因。在PCR反應(yīng)體系中，除含有緩沖液、模板DNA、4種脫氧核苷酸、引物外，還應(yīng)含有 Taq酶Taq酶；引物應(yīng)選用圖2中的 B和CB和C（填圖中字母，字母表示引物）。
（2）已知氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neo′的小鼠細(xì)胞。結(jié)合圖中推測(cè)，過(guò)程①選用的2種限制酶是 Ⅰ和ⅡⅠ和Ⅱ（填圖中的編號(hào)），③處的培養(yǎng)液中應(yīng)添加 G418G418（填“氨芐青霉素”或“G418”）。
（3）圖中過(guò)程④的本質(zhì)相當(dāng)于動(dòng)物的受精作用。在胚胎工程操作中，常以觀察到 兩個(gè)極體兩個(gè)極體作為受精的標(biāo)志。圖中的桑葚胚需經(jīng) 胚胎移植胚胎移植技術(shù)才能形成轉(zhuǎn)基因小鼠，若需獲得更多遺傳性狀相同的轉(zhuǎn)基因小鼠，可在該操作前對(duì)桑葚胚進(jìn)行 胚胎分割胚胎分割，該技術(shù)所需要的主要儀器設(shè)備為 實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀。
【答案】Taq酶；B和C；Ⅰ和Ⅱ；G418；兩個(gè)極體；胚胎移植；胚胎分割；實(shí)體顯微鏡和顯微操作儀
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：11引用：3難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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