鹽脅迫會影響植物的生長，可用轉基因技術提高植物的耐鹽能力。mybx是響應鹽脅迫的關鍵轉錄因子，其功能缺失突變體對150mmol?L-1的NaCl高度敏感。HKT1基因表達的Na+轉運蛋白介導Na+從木質部導管到木質部薄壁細胞的運輸，減少木質部的Na+含量，從而提高植物的耐鹽能力?？蒲腥藛T構建HKT1基因的表達載體獲得HKT1基因表達菌體，構建過程如圖所示。四種限制酶的識別序列及切割位點如表所示。回答下列問題：
| 限制酶 | HindⅢ | BamHⅠ | XhoⅠ | BglⅡ |
| 識別序列及切割位點 | A↓AGCTT | G↓GATCC | C↓TCGAG | A↓GATCT |
RNA酶抑制劑
RNA酶抑制劑
，以防止RNA降解。過程③要選擇合適的限制酶切割含HKT1基因的DNA片段，應選用的表中的限制酶是 HindⅢ、XhoI
HindⅢ、XhoI
。（2）過程⑤將重組質粒導入大腸桿菌。在篩選含有HKT1基因的大腸桿菌時，除必要的營養(yǎng)物質，還需要在培養(yǎng)基中添加
卡那霉素
卡那霉素
。提取重組質粒A將其導入農桿菌，用農桿菌侵染擬南芥mybz突變體花序，農桿菌的作用是 攜帶HKT1基因進入擬南芥細胞，并使HKT1基因在細胞內維持穩(wěn)定和表達
攜帶HKT1基因進入擬南芥細胞，并使HKT1基因在細胞內維持穩(wěn)定和表達
。（3）檢測轉HKT1基因擬南芥mybr突變株是否表達出Na+轉運蛋白時，可用
抗原―抗體雜交
抗原―抗體雜交
技術進行檢測。若Na+轉運蛋白高度表達，還需要進一步鑒定其抗性程度，實驗的思路是 將轉基因突變株種植在施加了濃度為150mmol?L-1的NaCl溶液的土壤中，檢測木質部薄壁細胞的含鹽量和植株的生長狀況
將轉基因突變株種植在施加了濃度為150mmol?L-1的NaCl溶液的土壤中，檢測木質部薄壁細胞的含鹽量和植株的生長狀況
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】RNA酶抑制劑；HindⅢ、XhoI；卡那霉素；攜帶HKT1基因進入擬南芥細胞，并使HKT1基因在細胞內維持穩(wěn)定和表達；抗原―抗體雜交；將轉基因突變株種植在施加了濃度為150mmol?L-1的NaCl溶液的土壤中，檢測木質部薄壁細胞的含鹽量和植株的生長狀況
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/25 8:0:9組卷：41引用：6難度：0.6
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發(fā)布：2024/12/20 5:0:2組卷：35引用：5難度：0.6 -
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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