凝乳酶是奶制品加工中經(jīng)常用到的一種酶，其傳統(tǒng)制備方法的產(chǎn)量遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足生產(chǎn)需要?？茖W(xué)家研究利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)凝乳酶，其部分環(huán)節(jié)如圖所示。請據(jù)圖回答問題：
（1）從剛出生5天的小牛皺胃組織中提取總RNA，經(jīng) 逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄過程獲得總cDNA。通過PCR技術(shù)可在總cDNA中專一性擴(kuò)增出凝乳酶基因，原因是 引物是根據(jù)凝乳酶基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的（或引物能與凝乳酶基因的cDNA 特異性結(jié)合）引物是根據(jù)凝乳酶基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的（或引物能與凝乳酶基因的cDNA 特異性結(jié)合）。
（2）過程①所使用的工具酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。凝乳酶基因和質(zhì)粒上均有NdeⅠ和XhoⅠ兩種酶的識(shí)別序列，分別是-C↓ATATG-，-C↓TCGAG-。用以上兩種酶分別切割目的基因和質(zhì)粒，得到的黏性末端分別為 -TATA和-AGCT--TATA和-AGCT-。
（3）大腸桿菌作為凝乳酶基因受體細(xì)胞的主要優(yōu)點(diǎn)有 繁殖快、易培養(yǎng)、產(chǎn)量高，且遺傳物質(zhì)相對較少繁殖快、易培養(yǎng)、產(chǎn)量高，且遺傳物質(zhì)相對較少（至少答出兩點(diǎn)）。用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，一般情況下，不能直接用未處理的大腸桿菌作為受體細(xì)胞，原因是 未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱。
（4）篩選出成功導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，經(jīng)多代培養(yǎng)后，仍能從大腸桿菌中提取出凝乳酶基因。據(jù)此判斷，你認(rèn)為凝乳酶基因是否已在大腸桿菌中成功轉(zhuǎn)化？請說明你的觀點(diǎn)及理由：不能。理由是大腸桿菌中檢測到凝乳酶基因，說明目的基因已經(jīng)成功導(dǎo)入大腸桿菌中，但不能說明凝乳酶基因已經(jīng)成功轉(zhuǎn)化不能。理由是大腸桿菌中檢測到凝乳酶基因，說明目的基因已經(jīng)成功導(dǎo)入大腸桿菌中，但不能說明凝乳酶基因已經(jīng)成功轉(zhuǎn)化。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；引物是根據(jù)凝乳酶基因的一段已知序列設(shè)計(jì)合成的（或引物能與凝乳酶基因的cDNA 特異性結(jié)合）；限制酶和DNA連接酶；-TATA和-AGCT-；繁殖快、易培養(yǎng)、產(chǎn)量高，且遺傳物質(zhì)相對較少；未處理的大腸桿菌吸收質(zhì)粒（外源DNA）的能力極弱；不能。理由是大腸桿菌中檢測到凝乳酶基因，說明目的基因已經(jīng)成功導(dǎo)入大腸桿菌中，但不能說明凝乳酶基因已經(jīng)成功轉(zhuǎn)化
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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