黃金大米是一種新型轉(zhuǎn)基因大米，其β-胡蘿卡素的含量是普通大米的23倍，因大米在拋光后呈黃色而得名。在轉(zhuǎn)基因大米中有3個外源基因，其中兩個分別為表達(dá)茄紅素合成酶的基因psy、胡蘿卜素脫氫酶的基因crtl（二者共同調(diào)控使大米胚乳細(xì)胞合成β-胡蘿卡素），第三個外源基因pmi 基因，已知不含pmi基因的植物細(xì)胞在含甘露醇的培養(yǎng)基上無法生長。請回答下列問題：
（1）科學(xué)家在培育“黃金大米”時，將crtl、psy、pmi基因插入Ti質(zhì)粒中，構(gòu)建了重組質(zhì)粒pSYN12424，該過程中目的基因是 crtl基因和psy基因crtl基因和psy基因，標(biāo)記基因是 pmi基因pmi基因，質(zhì)粒pSYN12424的作用是 將目的基因送入受體細(xì)胞，并使其在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和表達(dá)將目的基因送入受體細(xì)胞，并使其在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和表達(dá)。
（2）已知與psy基因及Ti質(zhì)粒有關(guān)的限制酶識別序列及切割位點(diǎn)如圖所示。
| 限制酶 | HindⅢ | EcoRⅠ | MfeⅠ |
| 識別序列及切割位點(diǎn) | A↓AGCTT TTCGA↑A |
G↓AATTC CTTAA↑G |
G↓AATTG GTTAA↑G |
2
2
種含目的基因的重組質(zhì)粒。為減少連接產(chǎn)物的種類并避免目的基因與質(zhì)粒錯誤連接，可選擇 HindⅢ、MfeⅠ
HindⅢ、MfeⅠ
酶同時處理psy基因所在的DNA分子和Ti質(zhì)粒。（4）將重組質(zhì)粒pSYN12424導(dǎo)入離體水稻細(xì)胞后，可利用含
甘露醇
甘露醇
的培養(yǎng)基對受體細(xì)胞進(jìn)行初步篩選。目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞，并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程，稱為 轉(zhuǎn)化
轉(zhuǎn)化
?！包S金大米”中psy和crtl基因只在胚乳細(xì)胞表達(dá)的原因可能是 目的基因上游插入了胚蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件
目的基因上游插入了胚蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件
。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】crtl基因和psy基因；pmi基因；將目的基因送入受體細(xì)胞，并使其在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳和表達(dá)；2；HindⅢ、MfeⅠ；甘露醇；轉(zhuǎn)化；目的基因上游插入了胚蛋白基因的啟動子等調(diào)控組件
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：3引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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