為評估外源基因Vgb在菊花中的穩(wěn)定性以及對生態(tài)環(huán)境的影響，研究人員在種植轉基因菊花的第二年，隨機選取轉基因菊花株系及周邊非轉基因菊花和各種雜草，提取DNA。根據(jù)Vgb設計特異性引物進行PCR擴增，電泳結果如圖。回答下列問題：
（1）將外源基因Vgb整合到菊花細胞需要先構建基因表達載體，構建基因表達載體時，需要使用的酶有 限制酶和DNA連接酶限制酶和DNA連接酶。重組載體進入菊花細胞并在細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為 轉化轉化。構建基因表達載體時，外源基因Vgb插在啟動子的上游，則在菊花細胞中檢測不到表達產(chǎn)物，主要原因是 目的基因無法轉錄目的基因無法轉錄。
（2）設計引物是PCR技術的關鍵步驟之一、根據(jù)Vgb設計特異性引物進行PCR擴增，某同學設計的一組引物（只標注了部分堿基序列）為
，此引物設計 不合理不合理（填“合理”或“不合理”），說明理由：引物Ⅰ和引物Ⅱ會因局部發(fā)生堿基互補配對而失效引物Ⅰ和引物Ⅱ會因局部發(fā)生堿基互補配對而失效。
（3）設置空白對照的目的是 排除實驗操作、試劑污染等對結果的影響排除實驗操作、試劑污染等對結果的影響。對于外源基因Vgb在菊花中的穩(wěn)定性以及對周邊植物的影響方面，圖中實驗結果表明 2年內(nèi)Vgb基因在菊花細胞中穩(wěn)定存在，且未發(fā)生向周邊植物的擴散2年內(nèi)Vgb基因在菊花細胞中穩(wěn)定存在，且未發(fā)生向周邊植物的擴散。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】限制酶和DNA連接酶；轉化；目的基因無法轉錄；不合理；引物Ⅰ和引物Ⅱ會因局部發(fā)生堿基互補配對而失效；排除實驗操作、試劑污染等對結果的影響；2年內(nèi)Vgb基因在菊花細胞中穩(wěn)定存在，且未發(fā)生向周邊植物的擴散
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：24引用：4難度：0.6
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6