當前位置： 2023年浙江省杭州市高考生物二模試卷> 試題詳情

某研究小組利用水稻細胞培育能產(chǎn)生HPV（人乳頭瘤病毒）-LI蛋白的水稻胚乳細胞生物反應器，為獲得HPV-L1蛋白提供一種新的高效、低廉的途徑，用于制備HPV疫苗。其基本流程包括表達載體的構建、農(nóng)桿菌轉化、水稻細胞轉化、轉基因植株的篩選等步驟，最終獲得能產(chǎn)生含HPV-L1蛋白胚乳細胞的轉基因水稻?；卮鹣铝袉栴}：
（1）目的基因的獲?。焊鶕?jù)研究目標，科研人員可以從
基因文庫
基因文庫
釣取HPV-L1基因，或者也可以分析HPV-L1蛋白的氨基酸序列，經(jīng)
化學方法合成
化學方法合成
得到目的基因，隨后，在合成基因的兩端分別引入MlyⅠ和XhoⅠ酶切位點，目的基因兩端設置不同酶切位點的目的是
使目的基因定向插入，減少自身環(huán)化，以便其正確轉錄和表達
使目的基因定向插入，減少自身環(huán)化，以便其正確轉錄和表達
。PCR是獲取HPV-L1基因的一種方法，PCR反應體系設計的兩種引物，在引物間和引物內(nèi)的堿基都不能互補，其原因是
防止引物內(nèi)或引物間結合形成雙鍵，導致引物與DNA模板結合效率降低
防止引物內(nèi)或引物間結合形成雙鍵，導致引物與DNA模板結合效率降低
。
（2）農(nóng)桿菌轉化：科研人員構建了如圖所示的表達載體，將其與經(jīng)
氯化鈣
氯化鈣
處理成感受態(tài)的農(nóng)桿菌細胞混合，并控制溫度進行
液體懸浮
液體懸浮
培養(yǎng)，完成轉化和細胞復蘇，隨后將菌液涂布在含
卡那霉素
卡那霉素
的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，挑取菌落進行PCR鑒定后再擴大培養(yǎng)待用。
（3）水稻細胞轉化：取水稻種子脫殼后經(jīng)
消毒
消毒
處理，置于誘導培養(yǎng)基中發(fā)生
脫分化
脫分化
過程形成愈傷組織。挑取生長良好的愈傷組織加入到（2）中得到菌液中共培養(yǎng)，完成轉化過程。為提高轉化效率，下列措施中可以采用的是哪幾項？
AC
AC
。
A.不時搖動培養(yǎng)液
B.縮短培養(yǎng)時間
C.控制菌液中農(nóng)桿菌濃度
D.降低培養(yǎng)溫度
（4）轉基因水稻的篩選：將轉化處理后的水稻愈傷組織放在含抗生素的培養(yǎng)基中除菌處理后，轉移至含有
潮霉素
潮霉素
的固體選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并誘導出
根和芽分生組織或胚狀體
根和芽分生組織或胚狀體
，繼續(xù)培養(yǎng)得到轉基因水稻。
（5）為了檢測是否成功導入HPV-L1基因并培育出能產(chǎn)生HPV-L1蛋白的水稻胚乳細胞生物反應器，請完善以下實驗思路：
Ⅰ.分別提取純化
胚乳細胞
胚乳細胞
的總DNA和蛋白質(zhì)，經(jīng)處理后分別固定在硝酸纖維素膜上。
Ⅱ.讓待測DNA與HPV-L1基因探針發(fā)生
核酸分子雜交
核酸分子雜交
，放射自顯影檢測以確定目的基因已經(jīng)成功導入。
Ⅲ.讓待測蛋白質(zhì)與
放射性HPV-L1蛋白抗體發(fā)生抗原-抗體雜交
放射性HPV-L1蛋白抗體發(fā)生抗原-抗體雜交
，放射自顯影檢測以確定目的基因已經(jīng)成功表達。

【答案】基因文庫；化學方法合成；使目的基因定向插入，減少自身環(huán)化，以便其正確轉錄和表達；防止引物內(nèi)或引物間結合形成雙鍵，導致引物與DNA模板結合效率降低；氯化鈣；液體懸?。豢敲顾?；消毒；脫分化；AC；潮霉素；根和芽分生組織或胚狀體；胚乳細胞；核酸分子雜交；放射性HPV-L1蛋白抗體發(fā)生抗原-抗體雜交

【解答】

【點評】

聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。

當前模式為游客模式，立即登錄查看試卷全部內(nèi)容及下載

發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：28引用：1難度：0.6

相似題

1．為探究AtCA2ox8基因在擬南芥中的生物學功能，研究者采用PCR技術從擬南芥基因組中擴增得到了該基因，并采用農(nóng)桿菌轉化法將該基因?qū)霐M南芥細胞中，得到了AtGA2ox8基因高表達的純合轉基因擬南芥植株，該植株表現(xiàn)為發(fā)育遲緩。下列相關敘述錯誤的是（　?。?/h2>

A．利用PCR擴增AtGA2ox8基因時，循環(huán)n次需要消耗引物2ⁿ個

B．將AtGA2ox8基因?qū)胧荏w細胞前需要先構建基因表達載體

C．利用農(nóng)桿菌轉化法培育轉基因擬南芥的過程中至少要進行兩次篩選

D．若AtGA2ox8基因的序列已知，還可通過人工合成的方法獲取該基因

發(fā)布：2024/11/8 22:30:1組卷：17引用：1難度：0.7

解析

2．CAR-T療法僅僅靠打針就能殺死癌細胞，一時間讓國內(nèi)醫(yī)藥圈為之沸騰。CAR-T療法的全稱是嵌合抗原受體T細胞療法，CAR-T療法的操作步驟是：①直接采取患者的外周血，分離出其中的T淋巴細胞；②將分離的T淋巴細胞在體外進行實驗室培養(yǎng)改造，裝載上具有識別腫瘤抗原的受體及其刺激分子，形成CAR-T細胞；③將CAR-T細胞在體外進行培養(yǎng)，大量擴增讓其數(shù)量成倍增加；④體外擴增后再回輸?shù)交颊唧w內(nèi)，從而識別并攻擊自身的腫瘤細胞。改造細胞回輸體內(nèi)后，這些細胞一旦遇見表達對應抗原的腫瘤細胞，便會被激活并再擴增，發(fā)揮其極大的特異殺傷力，殺死癌細胞?；卮鹣铝袉栴}：
（1）從患者體內(nèi)分離的T淋巴細胞，需要對其進行基因工程改造，以得到CAR-T細胞。
①基因工程最核心的步驟是

。
②構建基因表達載體時，一般將目的基因插在啟動子和終止子之間。啟動子的作用是

。
③可以通過PCR技術獲得大量目的基因，利用該技術時擴增目的基因時每次循環(huán)可分為

三步，其中第三步所使用的酶是

。
（2）體外培養(yǎng)患者CAR-T細胞時，不僅要確保

的環(huán)境條件，還要定期更換培養(yǎng)液，這樣做的目的是

。
（3）結合題干信息分析，CAR-T療法價格高昂的原因可能是

（答出2點即可）。
發(fā)布：2024/11/8 11:59:57組卷：3引用：2難度：0.5
解析
3．如圖為轉基因抗蟲煙草的培育流程，①②③④表示過程，其中②表示利用農(nóng)桿菌轉入受體細胞?；卮鹣铝邢嚓P問題：

（1）在①過程構建重組質(zhì)粒時，若用同一種限制性核酸內(nèi)切酶處理Ti質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段，使兩者形成粘性末端用于拼接，這種方法的明顯缺點是目的基因和質(zhì)粒

（答出2點即可）。另外，影響拼接效率的主要因素，除以上缺點和鹽離子濃度、滲透壓、溫度等環(huán)境因素外，還有

（答出2點即可）。
（2）在②過程中，將圖示重組Ti質(zhì)粒導入農(nóng)桿菌時，可用

處理農(nóng)桿菌，以提高轉化效率。操作之后，需要特定的培養(yǎng)基對農(nóng)桿菌進行篩選，其原因是

，最終篩選到的對象在相應選擇培養(yǎng)基上的存活情況是

。
在③過程常通過調(diào)節(jié)植物激素的適當配比，從愈傷組織誘導出胚狀體，并由此再生出新植株。愈傷組織特點

（寫出兩點）。
發(fā)布：2024/11/9 8:0:6組卷：2引用：1難度：0.7
解析

把好題分享給你的好友吧~~