圖1為胰島素基因結(jié)構(gòu)，圖2為pBR322質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)示意圖，圖中EcorⅠ、SmaⅠ、BamHⅠ和HindⅢ為限制酶，箭頭或線段所指為位點(diǎn)對應(yīng)酶切位點(diǎn)。研究人員欲用此質(zhì)粒構(gòu)建胰島素基因的表達(dá)載體，培育能產(chǎn)生人胰島素的大腸桿菌。請回答下列相關(guān)問題：
（1）若要進(jìn)行胰島素基因的擴(kuò)增，常采用PCR技術(shù)，該技術(shù)的原理是 DNA雙鏈復(fù)制DNA雙鏈復(fù)制。使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是 加熱到90～95℃加熱到90～95℃。
（2）已知DNA新鏈的合成方向是5′→3′，若利用圖2中的質(zhì)粒構(gòu)建基因表達(dá)載體，應(yīng)該選擇的引物為 引物4和引物5引物4和引物5。目前在PCR反應(yīng)中使用Taq酶而不使用大腸桿菌DNA聚合酶的主要原因 Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活。
（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時，選擇 BamHⅠ和HindⅢBamHⅠ和HindⅢ作為切割質(zhì)粒和目的基因的限制酶，可提高目的基因和運(yùn)載體的正確連接效率，避免目的基因末端發(fā)生任意連接。
（4）成功構(gòu)建的基因表達(dá)載體應(yīng)含有人胰島素基因、標(biāo)記基因、啟動子及終止子等，其中標(biāo)記基因的作用是 鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，并把含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，并把含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來。
（5）限制酶的特點(diǎn)是 能夠識別雙鏈DNA分子中的某種特定序列，并在特定位點(diǎn)切割DNA分子能夠識別雙鏈DNA分子中的某種特定序列，并在特定位點(diǎn)切割DNA分子。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】DNA雙鏈復(fù)制；加熱到90～95℃；引物4和引物5；Taq酶熱穩(wěn)定性高，而大腸桿菌DNA聚合酶在高溫下會失活；BamHⅠ和HindⅢ；鑒別受體細(xì)胞中是否含有目的基因，并把含有目的基因的受體細(xì)胞篩選出來；能夠識別雙鏈DNA分子中的某種特定序列，并在特定位點(diǎn)切割DNA分子
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：12引用：1難度：0.4
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7
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