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如表是幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中標注了相關限制酶的酶切位點，其中切割位點相同的酶不重復標注。請回答下列問題：
限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ
識別序列及切割位點 G↓GATCC
CCTAG↑G		 T↓GATCA
ACTAG↑T		 ↓GATC
CTAG↑		 A↓AGCTT
TTCGA↑A
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（1）用圖中質粒和目的基因構建重組質粒，應選用
BclⅠ
BclⅠ
和
HindⅢ
HindⅢ
兩種限制酶切割，酶切后的載體和目的基因片段，通過
DNA連接
DNA連接
酶作用后獲得重組質粒。為了擴增重組質粒，需將其轉入處于
感受
感受
態(tài)的大腸桿菌。
（2）為了篩選出轉入了重組質粒的大腸桿菌，應在篩選平板培養(yǎng)基中添加
四環(huán)素
四環(huán)素
，平板上長出的菌落，常用PCR鑒定，所用的引物組成為圖2中
引物甲和引物丙
引物甲和引物丙
。
（3）若BamHⅠ酶切的DNA末端與BclⅠ酶切的DNA末端連接，連接部位的6個堿基對序列為
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，對于該部位，這兩種酶
都不能
都不能
（填“都能”“都不能”或“只有一種能”）切開。
（4）若用Sau3AⅠ切圖1質粒最多可能獲得
7
7
種大小不同的DNA片段。

【答案】BclⅠ；HindⅢ；DNA連接；感受；四環(huán)素；引物甲和引物丙；菁優(yōu)網(wǎng)；都不能；7
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/5/1 8:0:8組卷：6引用：1難度：0.5
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  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　　）
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    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術獲取目標產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因導入受體細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當復制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設計的PCR引物應為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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