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菁優(yōu)網(wǎng)豬大腸桿菌會引起仔豬發(fā)生腸炎、腸毒血癥等疾病。LTB和ST1是豬源大腸桿菌腸毒素基因。研究人員通過重組PCR技術(shù)構(gòu)建了LTB-ST1融合基因,其表達產(chǎn)物L(fēng)TB-ST1融合蛋白可有效預(yù)防仔豬黃痢,該融合基因構(gòu)建過程如圖所示。請回答:
(1)重組PCR技術(shù)依據(jù)的生物學(xué)原理是
DNA的半保留復(fù)制
DNA的半保留復(fù)制
。
(2)PCR1和PCR2是在兩個不同反應(yīng)體系中進行的,兩個反應(yīng)體系中加入的物質(zhì)中不同的是
模板、引物
模板、引物
。PCR1和PCR2的目的是
擴增出末端部分堿基序列互補配對的LTB和ST1單鏈
擴增出末端部分堿基序列互補配對的LTB和ST1單鏈
,從而有利于LTB基因和ST1基因融合。
(3)在②過程中,PCR1和PCR2產(chǎn)物的作用是作為
BC
BC

A.原料
B.模板
C.引物
D.酶
(4)定點突變是指使基因特定位點發(fā)生堿基對的增添、缺失或者替換。重組PCR技術(shù)不僅可用于構(gòu)建融合基因,還可用于基因定點突變。請結(jié)合試題圖示,說明利用重組PCR技術(shù)進行基因定點突變的方法
根據(jù)突變位點的堿基序列設(shè)計引物P2和P3,進行重組PCR
根據(jù)突變位點的堿基序列設(shè)計引物P2和P3,進行重組PCR
。

【答案】DNA的半保留復(fù)制;模板、引物;擴增出末端部分堿基序列互補配對的LTB和ST1單鏈;BC;根據(jù)突變位點的堿基序列設(shè)計引物P2和P3,進行重組PCR
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/7/25 8:0:9組卷:9引用:3難度:0.6
相似題
  • 1.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6
  • 菁優(yōu)網(wǎng)2.PCR技術(shù)不僅可以擴增目的基因,還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進行兩次PCR,其操作步驟為:
    ①根據(jù)目的基因序列設(shè)計引物,得到兩個常規(guī)引物,分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物;
    ②根據(jù)突變堿基所處序列位置設(shè)計突變上游引物,突變位點位于突變引物序列的中間位置
    ③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進行第一次PCR反應(yīng)得到下游大引物;
    ④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進行第二次PCR擴增,得到突變目的基因序列。回答下列問題:
    (1)PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關(guān),DNA中G+C的含量越多,要求的變性溫度越高。其原因是
     
    。該PCR擴增技術(shù)所需的基本條件是
     
    種引物、原料、模板、
     
    。
    (2)在第一次PCR反應(yīng)中,形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過
     
    次復(fù)制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的
     
    條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比,該突變技術(shù)的優(yōu)點是
     
    。
    (3)如果要利用微生物進一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物,其步驟包括:
     
    、
     
    、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進行連接后,需先用
     
    處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導(dǎo)入馬鈴薯細(xì)胞,將馬鈴薯細(xì)胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是
     
    。檢測目的基因是否在馬鈴薯細(xì)胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA,所采用的方法是
     

    發(fā)布:2024/12/30 23:0:2組卷:32引用:3難度:0.6
  • 3.下列關(guān)于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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