豬大腸桿菌會(huì)引起仔豬發(fā)生腸炎、腸毒血癥等疾病。LTB和ST1是豬源大腸桿菌腸毒素基因。研究人員通過重組PCR技術(shù)構(gòu)建了LTB-ST1融合基因,其表達(dá)產(chǎn)物L(fēng)TB-ST1融合蛋白可有效預(yù)防仔豬黃痢,該融合基因構(gòu)建過程如圖所示。請回答:
(1)重組PCR技術(shù)依據(jù)的生物學(xué)原理是
DNA的半保留復(fù)制
DNA的半保留復(fù)制
。
(2)PCR1和PCR2是在兩個(gè)不同反應(yīng)體系中進(jìn)行的,兩個(gè)反應(yīng)體系中加入的物質(zhì)中不同的是 模板、引物
模板、引物
。PCR1和PCR2的目的是 擴(kuò)增出末端部分堿基序列互補(bǔ)配對的LTB和ST1單鏈
擴(kuò)增出末端部分堿基序列互補(bǔ)配對的LTB和ST1單鏈
,從而有利于LTB基因和ST1基因融合。
(3)在②過程中,PCR1和PCR2產(chǎn)物的作用是作為 BC
BC
。
A.原料
B.模板
C.引物
D.酶
(4)定點(diǎn)突變是指使基因特定位點(diǎn)發(fā)生堿基對的增添、缺失或者替換。重組PCR技術(shù)不僅可用于構(gòu)建融合基因,還可用于基因定點(diǎn)突變。請結(jié)合試題圖示,說明利用重組PCR技術(shù)進(jìn)行基因定點(diǎn)突變的方法 根據(jù)突變位點(diǎn)的堿基序列設(shè)計(jì)引物P2和P3,進(jìn)行重組PCR
根據(jù)突變位點(diǎn)的堿基序列設(shè)計(jì)引物P2和P3,進(jìn)行重組PCR
。