工業(yè)上青蒿素一般從青蒿植株中提取,產(chǎn)量低,價格高.基因工程及細胞工程等為培育出高青蒿素含量的青蒿提供了思路.科學家先通過紫外線處理大量青蒿幼苗后,偶然發(fā)現(xiàn)一株高產(chǎn)植株,通過基因測序發(fā)現(xiàn)該高產(chǎn)植株控制青蒿素合成相關(guān)的一種關(guān)鍵酶的基因發(fā)生了突變.
(1)提取了高產(chǎn)植株的全部DNA后,要想快速大量獲得該突變基因可以采用PCR技術(shù),該技術(shù)的原理是DNA雙鏈復制DNA雙鏈復制.
(2)如果用青蒿某個時期mRNA反轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生雙鏈cDNA片段,獲得的cDNA與青蒿細胞中該基因堿基序列不同不同(填“相同”或“不同”).用某雙鏈cDNA進行PCR擴增,進行了30個循環(huán)后,理論上可以產(chǎn)生約為230230個DNA分子片段.
(3)將獲得的突變基因?qū)肫胀ㄇ噍镏?,先?gòu)建基因表達載體,圖1、2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點.請回答:
用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒,不能使用SmaⅠ切割,原因是SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因,構(gòu)建好的重組質(zhì)粒在其目的基因前要加上特殊的啟動子,啟動子是RNA聚合酶RNA聚合酶識別結(jié)合位點.
(4)將目的基因?qū)胫参锛毎捎米疃嗟姆椒ㄊ?!--BA-->農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,檢測目的基因是否發(fā)揮功能的第一步,需要檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA.最后還需要通過植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)技術(shù)培育出青蒿植株.
【考點】基因工程的操作過程綜合.
【答案】DNA雙鏈復制;不同;230;SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因及外源DNA中的目的基因;RNA聚合酶;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;目的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA;植物組織培養(yǎng)
【解答】
【點評】
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