癌癥患者進行化療后，體內白細胞數(shù)量會大幅降低，可注射GM-CSF（一種細胞因子）以增加白細胞數(shù)量。某科研團隊通過基因工程技術大量生產GM-CSF，滿足了臨床需求。相關限制酶的酶切位點如圖所示。
回答下列問題。
（l）體外大量獲得GM-CSF基因的方法是 PCRPCR，用該方法獲取GM-CSF基因的過程中需要加入一對引物，其作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸。
（2）據(jù)圖分析，該科研團隊構建GM-CSF基因表達載體時，不選擇限制酶BamHⅠ的原因是 該酶會破壞GM-CSF基因該酶會破壞GM-CSF基因；與只選擇EcoRⅠ相比，選擇PstⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理目的基因和質粒的優(yōu)點是 防止GM-CSF基因、質粒的自身環(huán)化，防止反向連接防止GM-CSF基因、質粒的自身環(huán)化，防止反向連接。
（3）將GM-CSF基因表達載體導入大腸桿菌前，一般先用Ca2+處理大腸桿菌的目的是 使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)。
（4）該科研團隊利用質粒中的標記基因篩選出含有GM-CSF基因重組質粒的大腸桿菌。篩選時，應先用含有 氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基1篩選已導入質粒的大腸桿菌，再將培養(yǎng)基1中的菌落分別單獨接種到含 四環(huán)素四環(huán)素的培養(yǎng)基2中進行篩選。若在培養(yǎng)基2中未形成菌落，則其在培養(yǎng)基l中形成的對應菌落是由含重組質粒的大腸桿菌繁殖而成的。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】PCR；使DNA聚合酶能夠從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸；該酶會破壞GM-CSF基因；防止GM-CSF基因、質粒的自身環(huán)化，防止反向連接；使細胞處于一種能吸收周圍環(huán)境中DNA分子的生理狀態(tài)；氨芐青霉素；四環(huán)素
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/11 8:0:9組卷：5引用：1難度：0.6
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質工程技術敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6