人類胰島素基因位于第11號染色體上,長度為8416bp,人類胰島素的氨基酸序列已知?;卮鹣铝邢嚓P(guān)問題。
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(1)如圖是利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因的方法,除了此方法外,還可以利用的方法是 從基因文庫獲取或人工合成從基因文庫獲取或人工合成。
(2)利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因,在緩沖液中除了要添加模板和引物外,還需要添加的物質(zhì)有 四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶)。
(3)至少經(jīng)過 33輪循環(huán)可以得到所需的目的基因,一個DNA分子經(jīng)過5輪循環(huán),需要引物A 3131個,從PCR的過程和DNA分子的特點(diǎn),試著寫出設(shè)計(jì)引物需要注意的問題:引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列、引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列(答出2點(diǎn)即可)。
(4)利用瓊脂糖凝膠電泳分離不同DNA分子,遷移速率與 凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象,(寫出3點(diǎn))等有關(guān)。
(5)利用圖示方法獲取的目的基因,直接構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入大腸桿菌,不能不能(填“能”或“不能”)表達(dá)出人胰島素,理由是 因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子,大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯,導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子,大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯,導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定;基因工程的操作過程綜合.
【答案】從基因文庫獲取或人工合成;四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶(Taq酶);3;31;引物自身不能有互補(bǔ)序列 引物之間不能有互補(bǔ)序列;引物長度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過多互補(bǔ)的序列;凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象;不能;因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子,大腸桿菌無法正常識別內(nèi)含子而對內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯,導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯誤
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/22 8:0:10組卷:5引用:1難度:0.6
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