當(dāng)前位置： 2022-2023學(xué)年安徽省亳州二中高二（下）期末生物試卷（A卷）> 試題詳情

人類胰島素基因位于第11號(hào)染色體上，長(zhǎng)度為8416bp,人類胰島素的氨基酸序列已知?；卮鹣铝邢嚓P(guān)問(wèn)題。

（1）如圖是利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因的方法，除了此方法外，還可以利用的方法是
從基因文庫(kù)獲取或人工合成
從基因文庫(kù)獲取或人工合成
。
（2）利用PCR技術(shù)獲取人胰島素基因，在緩沖液中除了要添加模板和引物外，還需要添加的物質(zhì)有
四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）
。
（3）至少經(jīng)過(guò)
3
3
輪循環(huán)可以得到所需的目的基因，一個(gè)DNA分子經(jīng)過(guò)5輪循環(huán)，需要引物A
31
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個(gè)，從PCR的過(guò)程和DNA分子的特點(diǎn)，試著寫出設(shè)計(jì)引物需要注意的問(wèn)題：
引物自身不能有互補(bǔ)序列引物之間不能有互補(bǔ)序列
引物自身不能有互補(bǔ)序列引物之間不能有互補(bǔ)序列
、
引物長(zhǎng)度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過(guò)多互補(bǔ)的序列
引物長(zhǎng)度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過(guò)多互補(bǔ)的序列
（答出2點(diǎn)即可）。
（4）利用瓊脂糖凝膠電泳分離不同DNA分子，遷移速率與
凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象
凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象
，（寫出3點(diǎn)）等有關(guān)。
（5）利用圖示方法獲取的目的基因，直接構(gòu)建基因表達(dá)載體后導(dǎo)入大腸桿菌，
不能
不能
（填“能”或“不能”）表達(dá)出人胰島素，理由是
因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無(wú)法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤
因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無(wú)法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤
。

【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定；基因工程的操作過(guò)程綜合．

【答案】從基因文庫(kù)獲取或人工合成；四種脫氧核苷酸和熱穩(wěn)定DNA聚合酶（Taq酶）；3；31；引物自身不能有互補(bǔ)序列引物之間不能有互補(bǔ)序列；引物長(zhǎng)度適當(dāng)、引物能與目的基因兩側(cè)特異性結(jié)合、避免與擴(kuò)增DNA內(nèi)有過(guò)多互補(bǔ)的序列；凝膠的濃度、DNA分子的大小和構(gòu)象；不能；因?yàn)榇朔椒ǐ@得的目的基因中含有內(nèi)含子，大腸桿菌無(wú)法正常識(shí)別內(nèi)含子而對(duì)內(nèi)含子部分轉(zhuǎn)錄的mRNA進(jìn)行翻譯，導(dǎo)致合成的蛋白質(zhì)出現(xiàn)錯(cuò)誤

【解答】

【點(diǎn)評(píng)】

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發(fā)布：2024/6/22 8:0:10組卷：5引用：1難度：0.6

相似題

1．PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理，進(jìn)行生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題：
（1）PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、

、

。
（2）科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化

方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的半保留復(fù)制過(guò)程，有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段（稱為岡崎片段），再形成較長(zhǎng)的分子，可推測(cè)參與以上過(guò)程的酶有DNA聚合酶、

、

。在PCR過(guò)程中無(wú)岡崎片段形成，原因是細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的復(fù)制過(guò)程特點(diǎn)是

，PCR過(guò)程的特點(diǎn)是

。
（3）雙脫氧核苷三磷酸（ddNTP）與脫氧核苷三磷酸（dNTP）的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后，子鏈的延伸立即終止?，F(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段，通過(guò)PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端（3'為堿基C）不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段，將以上子鏈 DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到

種不同長(zhǎng)度的子鏈 DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA 聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外，還需要加入下列哪組原料

。
A.dGTP，dATP，dTTP
B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C.dGTP，dATP，dTTP，dCTP
D.ddGTP，ddATP，ddTTP，ddCTP
（4）如圖3為形成單鏈DNA后，再進(jìn)行PCR擴(kuò)增示意圖。

催化①過(guò)程的酶是

；核酸酶H的作用是

。如果某RNA單鏈中一共有80個(gè)堿基，其中C有15個(gè)，A與U之和占該鏈堿基含量的40%，經(jīng)過(guò)以上若干過(guò)程后共獲得8個(gè)雙鏈 DNA，此過(guò)程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為

（以上過(guò)程不考慮引物）。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：19引用：1難度：0.7
解析

2．在新冠病毒的核酸檢測(cè)過(guò)程中采用的逆轉(zhuǎn)錄PCR（RT-PCR），是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）的廣泛應(yīng)用。在RT-PCR中，一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)DNA，再以此為模板通過(guò)PCR進(jìn)行DNA擴(kuò)增，進(jìn)而獲得檢測(cè)的目的基因S。下列關(guān)于RT-PCR的敘述錯(cuò)誤的是（　　）

A．RT-PCR所用的酶包括逆轉(zhuǎn)錄酶和熱穩(wěn)定RNA聚合酶

B．RT-PCR所用的兩引物序列不同，兩者間可進(jìn)行互補(bǔ)配對(duì)

C．RT-PCR過(guò)程中需添加ATP，反應(yīng)過(guò)程中會(huì)有磷酸鍵斷裂

D．至少經(jīng)過(guò)2次循環(huán)，方可獲取與目的基因等長(zhǎng)的DNA單鏈

發(fā)布：2024/10/31 0:0:1組卷：4引用：1難度：0.6

解析

3．原位PCR技術(shù)是利用原位PCR儀，在組織或細(xì)胞中靶DNA所在的位置上進(jìn)行的PCR循環(huán)擴(kuò)增，通過(guò)摻入標(biāo)記基因直接顯色或結(jié)合原位雜交進(jìn)行檢測(cè)的方法。進(jìn)行擴(kuò)增時(shí)，反應(yīng)體系中的反應(yīng)成分需滲透到組織或細(xì)胞的靶DNA處才能進(jìn)行擴(kuò)增。PCR反應(yīng)體系中需要添加一定濃度的Mg²⁺，而組織細(xì)胞間的物質(zhì)會(huì)吸附Mg²⁺，使進(jìn)入細(xì)胞的Mg²⁺減少。下列說(shuō)法正確的是（　　）

A．PCR技術(shù)中復(fù)性是當(dāng)溫度下降到65℃時(shí)，兩種引物與兩條DNA單鏈結(jié)合的過(guò)程

B．反應(yīng)體系中dNTP作為擴(kuò)增的原料，會(huì)依次連接到子鏈的5′端

C．反應(yīng)體系中引物的G，C堿基含量越高越好，因?yàn)樵礁咭锝Y(jié)合的特異性越強(qiáng)

D．原位PCR反應(yīng)體系中使用的Mg²⁺濃度要比常規(guī)PCR高

發(fā)布：2024/10/31 21:0:2組卷：10引用：3難度：0.7

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