2020年12月中央經(jīng)濟(jì)工作會(huì)議指出：種子是農(nóng)業(yè)的“芯片”，要開(kāi)展種源“卡脖子”技術(shù)攻關(guān)?！翱瓜x(chóng)和耐除草劑玉米雙抗12-5”是我國(guó)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部于2020年1月頒發(fā)了轉(zhuǎn)基因安全證書(shū)的玉米新品種，如圖為該轉(zhuǎn)基因玉米的培育過(guò)程示意圖。請(qǐng)回答：

（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體需要用到的工具酶有

限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶

限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶

?？瓜x(chóng)和耐除草劑基因必須插入到Ti質(zhì)粒的T-DNA中，原因是

T-DNA可以轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上

T-DNA可以轉(zhuǎn)移并整合到受體細(xì)胞的染色體DNA上

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（2）重組質(zhì)粒無(wú)需插入抗生素抗性基因作為篩選標(biāo)記基因，理由是

抗蟲(chóng)和耐除草劑基因本身就可作為篩選標(biāo)記基因

抗蟲(chóng)和耐除草劑基因本身就可作為篩選標(biāo)記基因

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（3）植物組織細(xì)胞通過(guò)培養(yǎng)可長(zhǎng)成完整植株，該技術(shù)手段的原理是

植物細(xì)胞具有全能性

植物細(xì)胞具有全能性

，請(qǐng)用關(guān)鍵詞與“→”組合的形式簡(jiǎn)要表述該技術(shù)過(guò)程：

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（4）檢測(cè)玉米植株細(xì)胞內(nèi)是否合成抗蟲(chóng)蛋白，一般所用的檢測(cè)方法是

抗原一抗體雜交法

抗原一抗體雜交法

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