近年來，過度依賴提高養(yǎng)殖密度和過量投餌的養(yǎng)殖方式，導(dǎo)致出現(xiàn)養(yǎng)殖環(huán)境生態(tài)失調(diào)、病害頻發(fā)、水資源浪費(fèi)和污染嚴(yán)重等現(xiàn)象。益生菌能夠改善水質(zhì)，抑制有害菌的生長，保持微生態(tài)平衡，是水產(chǎn)動物防控病害的有效手段之一，研究人員從鯽魚腸道樣品中分離出具有抑菌效果的菌株，為開發(fā)適用于水產(chǎn)養(yǎng)殖的抑菌類微生態(tài)制劑提供參考。抑菌效果用指示菌（嗜水氣單胞菌、哈維氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌等有害菌）進(jìn)行檢驗(yàn)。用到LB液體培養(yǎng)基：蛋白胨1%、酵母膏0.5%、氯化鈉0.5%、水100mL。請回答下列問題：
（1）LB液體培養(yǎng)基中的蛋白胨能為微生物提供 碳源 氮源（和維生素）碳源 氮源（和維生素）；用高壓蒸汽滅菌鍋對培養(yǎng)基進(jìn)行滅菌時(shí)，水沸騰后，待 冷空氣徹底排除后冷空氣徹底排除后，再關(guān)閉排氣閥。
（2）將樣品鯽魚腸道內(nèi)容物制成稀釋液，接種至LB液體培養(yǎng)基進(jìn)行富集培養(yǎng)，目的是 增加目的菌的數(shù)量增加目的菌的數(shù)量；將富集培養(yǎng)液加至LB固體培養(yǎng)基平板，涂布均勻，37℃恒溫培養(yǎng)。配制LB固體培養(yǎng)基時(shí)，通常需向LB液體培養(yǎng)基中加入 瓊脂（凝固劑）瓊脂（凝固劑）；菌落長出后，常采用 平板劃線平板劃線法將其轉(zhuǎn)接種到新的平板上進(jìn)一步純化，得到初篩菌株。
（3）采用打孔法測定初篩菌株的抑菌效果：吸取稀釋好的 指示指示菌液0.6mL加入平板；使用2.7mm的直徑打孔器，在平板上垂直均勻打孔，標(biāo)記菌株編號，每孔分別注入10μL 初篩菌株初篩菌株菌液，培養(yǎng)24h。每個(gè)樣品做3個(gè)平板。培養(yǎng)完畢，檢測板上出現(xiàn)抑菌圈，測量 抑菌圈的直徑抑菌圈的直徑，取平均值。
（4）經(jīng)鑒定，菌株YJ4的抑菌效果最好，為進(jìn)一步驗(yàn)證菌株YJ4的安全性，選擇健康鯽魚80尾，隨機(jī)均分為4組。實(shí)驗(yàn)組分別采用腹腔注射法注射0.1mL濃度分別為1×109、1×108和1×107單位/mL的YJ4菌懸液，適宜條件下飼養(yǎng)7d,觀察并記錄實(shí)驗(yàn)魚游動、攝食及死亡情況，最后剖檢，觀察有無病變，對照組的處理為 采用腹腔注射法注射0.1mL生理鹽水采用腹腔注射法注射0.1mL生理鹽水。
【考點(diǎn)】微生物的選擇培養(yǎng)（稀釋涂布平板法）．
【答案】碳源 氮源（和維生素）；冷空氣徹底排除后；增加目的菌的數(shù)量；瓊脂（凝固劑）；平板劃線；指示；初篩菌株；抑菌圈的直徑；采用腹腔注射法注射0.1mL生理鹽水
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：11引用：1難度：0.5
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1．丙草胺（C15H22ClNO2）是一種廣泛應(yīng)用的除草劑，能抑制土壤細(xì)菌、放線菌和真菌的生長。某研究小組從某地土壤中分離獲得能有效降解丙草胺的細(xì)菌菌株，并對其計(jì)數(shù)（如圖所示），以期為修復(fù)污染土壤提供微生物資源。下列敘述錯誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 4:0:1組卷：17引用：3難度：0.7 -
2．回答下列關(guān)于微生物的問題．
阿拉伯膠是一種多糖，研究者從某地合歡樹下距離地表深10～15cm處的土樣中初篩到能合成阿拉伯膠降解酶的菌株SM01，以下為該菌株的鑒定過程．
（1）為獲得單菌落，可采用平板劃線法或法將初篩菌液接種在培養(yǎng)基上．46SM01菌落為粉白色，初期呈突起絮狀，在顯微鏡下觀察到，菌絲白色致密，且有分生孢子，細(xì)胞核直徑約1μm,初步推測為真菌，則其特征中，最能說明SM01是真菌的是有細(xì)胞核，且有分生孢子．SM01還一定具有的結(jié)構(gòu)有（多選）．
A．細(xì)胞膜 B．核糖體 C．?dāng)M核 D．莢膜
（2）表中培養(yǎng)液pH均為6.0，若對SM01中阿拉伯膠降解酶的活力進(jìn)行測定，則應(yīng)選用表中的培養(yǎng)液，針對不選用的其他培養(yǎng)液，分別說明原因：
①缺少，SM01不能很好生長
②具有，會影響對SM01自身產(chǎn)生的酶活力的測定結(jié)果
③缺乏，會影響SM01的生長，也無法對阿拉伯膠酶活力進(jìn)行測定．
表 試驗(yàn)用培養(yǎng)液配方培養(yǎng)液 阿拉伯膠 阿拉伯膠酶 NaNO3 牛肉膏 K2SOPO4 MgSO4?7H2O KCl FeSO4?7H2O
A
25g/L__ __ __
g/L
g/L
g/Lg/L B
25g/L
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L
g/LC __ __
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/LD
25g/L__
g/L__
g/L
g/L
g/L
g/L發(fā)布：2025/1/2 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.5 -
3．為了防治大氣污染，煙氣脫硫是環(huán)保領(lǐng)域迫切需要解決的問題．研究人員為了獲得用于煙氣脫硫的脫硫細(xì)菌，并了解其生長規(guī)律，進(jìn)行了如下操作．請回答下列問題：
（1）采樣與細(xì)菌的篩選：在某熱電廠煙囪周圍區(qū)域要盡量做到采集土樣．為確保能夠從樣品中分離到所需要的煙氣脫硫細(xì)菌，可以通過增加脫硫菌的濃度．
（2）馴化脫硫細(xì)菌：將篩選出的脫硫細(xì)菌接種于有少量無菌水的三角瓶中，邊攪拌邊持續(xù)通入SO2氣體幾分鐘，然后接種到培養(yǎng)基上，待長出菌落后再重復(fù)上述步驟，并逐步延長通SO2的時(shí)間，同時(shí)逐步降低培養(yǎng)基的pH．此操作的目的是分離出的脫硫細(xì)菌．
（3）培養(yǎng)與觀察：一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時(shí)間），馴化后的脫硫細(xì)菌表現(xiàn)出穩(wěn)定的特征．用高倍顯微鏡（填“可以”或“不可以”）觀察到脫硫細(xì)菌的核糖體．
（4）探究生長規(guī)律：在計(jì)數(shù)時(shí)，計(jì)數(shù)方法有稀釋涂布平板法和直接計(jì)數(shù)法．在用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)時(shí)，當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時(shí)，培養(yǎng)基表面生長的一個(gè)菌落來源于樣品稀釋液中的；通過統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活菌，通常推測統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往比活菌的實(shí)際數(shù)目．發(fā)布：2025/1/1 8:0:2組卷：6引用：2難度：0.5
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