某研究團(tuán)隊(duì)從沙漠野生檉柳中克隆出了一個(gè)耐鹽堿基因TcSR1。該團(tuán)隊(duì)用限制酶BalⅡ切割目的基因TcSR1,用限制酶BamHⅠ切割質(zhì)粒載體V3,兩種限制酶的識(shí)別序列及酶切位點(diǎn)如圖所示,經(jīng)過體外重組和轉(zhuǎn)化,最終獲得了能夠在鹽堿地生長的楊樹新品種。回答下列問題:
(1)使用限制酶BalⅡ和BamHⅠ切割得到的DNA片段末端均是 黏性黏性末端,用兩種酶分別切割目的基因和質(zhì)粒載體V3后,再用 DNA連接DNA連接酶處理,以構(gòu)建基因表達(dá)載體,質(zhì)粒載體V3一般應(yīng)具有 標(biāo)記基因標(biāo)記基因以供重組DNA的篩選。
(2)將目的基因?qū)霔顦浼?xì)胞,最常采用的方法是 農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法。若要檢測楊樹植株中目的基因TcSR1是否發(fā)生轉(zhuǎn)錄,可采用 分子雜交分子雜交技術(shù),需要將 放射性同位素標(biāo)記的基因TcSR1放射性同位素標(biāo)記的基因TcSR1片段制成探針,通過檢測放射性達(dá)到目的。
(3)植物組織培養(yǎng)技術(shù)與基因工程技術(shù)相結(jié)合可獲得轉(zhuǎn)基因植株,將含有目的基因的細(xì)胞培養(yǎng)成一個(gè)完整植株的基本程序是 轉(zhuǎn)基因細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化完整植物轉(zhuǎn)基因細(xì)胞脫分化愈傷組織再分化完整植物(用流程圖表示)。
脫分化
再分化
脫分化
再分化
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;植物的組織培養(yǎng).
【答案】黏性;DNA連接;標(biāo)記基因;農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法;分子雜交;放射性同位素標(biāo)記的基因TcSR1;轉(zhuǎn)基因細(xì)胞愈傷組織完整植物
脫分化
再分化
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:8引用:2難度:0.6
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