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現(xiàn)有甲、乙兩種可能有一定毒性的化學(xué)物質(zhì),實驗室研究人員欲通過動物細胞培養(yǎng)的方法來鑒定它們是否有毒性,并比較二者毒性的強弱.請你以一個研究人員的身份參與此項研究,完成下列實驗報告并回答有關(guān)問題.Ⅰ.實驗原理:
有毒物質(zhì)能誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生變異
有毒物質(zhì)能誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生變異

根據(jù)這種變異細胞占全部培養(yǎng)細胞的百分?jǐn)?shù)(以下稱Q值),可判斷該化學(xué)物質(zhì)的毒性.
Ⅱ.實驗材料:活的小白鼠胚胎.
Ⅲ.藥品用具:胰蛋白酶液、動物細胞培養(yǎng)液、動物細胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、培養(yǎng)瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡、小白鼠正常體細胞有絲分裂各時期高倍顯微照片.Ⅳ.實驗步驟
(1)制備細胞懸浮液
把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎,轉(zhuǎn)入錐形瓶中,加入胰蛋白酶液處理,使胚胎組織離散成單個細胞,再加入動物細胞培養(yǎng)液,制成細胞懸浮液.
(2)進行細胞培養(yǎng)
①取A、B、C三個潔凈的培養(yǎng)瓶,
消毒滅菌,加入等量的細胞懸浮液
消毒滅菌,加入等量的細胞懸浮液

②向A培養(yǎng)瓶中加入化學(xué)物質(zhì)甲,向B培養(yǎng)瓶中加入等量的化學(xué)物質(zhì)乙,并將培養(yǎng)瓶搖勻.
③向C瓶內(nèi)
加入等量生理鹽水
加入等量生理鹽水

(3)制作臨時裝片
①當(dāng)細胞增殖到大約第8代左右時,同時從恒溫箱中取出三個培養(yǎng)瓶,用胰蛋白酶液處理,使培養(yǎng)的細胞從瓶壁上脫落,再加入動物細胞固定液以便迅速殺死細胞并固定細胞.
②靜置一段時間后,分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細胞懸浮液,滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片的中央,
用適宜濃度龍膽紫溶液染色
用適宜濃度龍膽紫溶液染色
,3~5min后,蓋上蓋玻片.
(4)鏡檢和統(tǒng)計
把臨時裝片放在顯微鏡下,先用低倍鏡后用高倍鏡,尋找處于
細胞有絲分裂中
細胞有絲分裂中
期的細胞,并與
C組
C組
對比以確認(rèn)發(fā)生變異的細胞,同時統(tǒng)計該期變異的細胞占該期細胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)(Q值).
Ⅴ.結(jié)果與結(jié)論
經(jīng)研究人員實驗得知:A、B、C三個培養(yǎng)瓶的Q值依次為:QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%,由此可知該實驗的結(jié)論是
甲、乙都是有毒性的,且乙的毒性大于甲
甲、乙都是有毒性的,且乙的毒性大于甲
.
Ⅵ.回答問題
在實驗中,C培養(yǎng)瓶起什么作用?
對照
對照

【答案】有毒物質(zhì)能誘導(dǎo)細胞產(chǎn)生變異;消毒滅菌,加入等量的細胞懸浮液;加入等量生理鹽水;用適宜濃度龍膽紫溶液染色;細胞有絲分裂中;C組;甲、乙都是有毒性的,且乙的毒性大于甲;對照
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:11引用:1難度:0.5
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