近日全國(guó)多地爆發(fā)甲型流感,其中又以甲型H1N1流感為主,病原體為一種新型的甲型H1N1流感病毒,患者常表現(xiàn)出畏寒、發(fā)熱,頭痛等癥狀,某科研團(tuán)隊(duì)欲研究HIN1病毒表面的抗原蛋白A以生產(chǎn)治療甲型流感的抗體,請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)H1N1流感病毒是一種RNA病毒,科研人員研究制備重組H1N1流感疫苗的過(guò)程如圖1,過(guò)程③代表PCR過(guò)程,其原理是 DNA半保留復(fù)制DNA半保留復(fù)制,為了便于擴(kuò)增的A蛋白基因片段與腺病毒載體連接,需要在引物的 5′5′(填“3′”或“5′”)端加上限制酶切位點(diǎn),設(shè)計(jì)引物時(shí)需要避免引物之間由于 堿基互補(bǔ)配對(duì)堿基互補(bǔ)配對(duì)而造成引物自連。過(guò)程④需要的工具酶是 限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶。
(2)科研人員準(zhǔn)備繼續(xù)制備抗A蛋白的單克隆抗體,如圖2所示,過(guò)程⑥可用動(dòng)物細(xì)胞特有的 滅活病毒誘導(dǎo)滅活病毒誘導(dǎo)法誘導(dǎo)細(xì)胞融合,過(guò)程⑦需要進(jìn)行 克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè)克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè),乙的特點(diǎn)是 既可以大量增殖,又能產(chǎn)生所需的特定抗體既可以大量增殖,又能產(chǎn)生所需的特定抗體。
【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定;單克隆抗體及其應(yīng)用.
【答案】DNA半保留復(fù)制;5′;堿基互補(bǔ)配對(duì);限制酶、DNA連接酶;滅活病毒誘導(dǎo);克隆化培養(yǎng)和抗體檢測(cè);既可以大量增殖,又能產(chǎn)生所需的特定抗體
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:7引用:2難度:0.5
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1.PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理,進(jìn)行生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)。請(qǐng)回答有關(guān)問(wèn)題:
(1)PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、
(2)科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化
(3)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過(guò)PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段,將以上子鏈 DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到
A.dGTP,dATP,dTTP
B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
C.dGTP,dATP,dTTP,dCTP
D.ddGTP,ddATP,ddTTP,ddCTP
(4)如圖3為形成單鏈DNA后,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增示意圖。
催化①過(guò)程的酶是發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:19引用:1難度:0.7 -
2.在新冠病毒的核酸檢測(cè)過(guò)程中采用的逆轉(zhuǎn)錄PCR(RT-PCR),是聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)的廣泛應(yīng)用。在RT-PCR中,一條RNA鏈被逆轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)DNA,再以此為模板通過(guò)PCR進(jìn)行DNA擴(kuò)增,進(jìn)而獲得檢測(cè)的目的基因S。下列關(guān)于RT-PCR的敘述錯(cuò)誤的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/10/31 0:0:1組卷:4引用:1難度:0.6 -
3.原位PCR技術(shù)是利用原位PCR儀,在組織或細(xì)胞中靶DNA所在的位置上進(jìn)行的PCR循環(huán)擴(kuò)增,通過(guò)摻入標(biāo)記基因直接顯色或結(jié)合原位雜交進(jìn)行檢測(cè)的方法。進(jìn)行擴(kuò)增時(shí),反應(yīng)體系中的反應(yīng)成分需滲透到組織或細(xì)胞的靶DNA處才能進(jìn)行擴(kuò)增。PCR反應(yīng)體系中需要添加一定濃度的Mg2+,而組織細(xì)胞間的物質(zhì)會(huì)吸附Mg2+,使進(jìn)入細(xì)胞的Mg2+減少。下列說(shuō)法正確的是( ?。?/h2>
發(fā)布:2024/10/31 21:0:2組卷:10引用:3難度:0.7
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