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普通棉花中β-甘露糖苷酶基因（GhMnaA2）表達出的3-甘露糖苷酶能催化半纖維素降解，使棉纖維長度變短。為了培育長絨棉，科研人員構(gòu)建了反義GhMnaA2基因表達載體，獲得了轉(zhuǎn)基因長絨棉新品種，具體過程如圖所示，SmaⅠ，NotⅠ，HindⅢ和BamHⅠ為酶切位點，LB為T-DNA左邊界，RB為T-DNA右邊界。回答下列問題：
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（1）過程①中不用限制酶NotⅠ的原因是
限制酶NotI會破壞目的基因，且質(zhì)粒上沒有NotI的切割位點
限制酶NotI會破壞目的基因，且質(zhì)粒上沒有NotI的切割位點
。GhMnaA2的序列中包含內(nèi)含子等序列，可增大重組質(zhì)粒的分子量，使導入效率降低，請?zhí)岢鲆粋€解決此問題的方案：
從棉花細胞中提取GhMnaA2的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄獲得GhMnaA2的cDNA
從棉花細胞中提取GhMnaA2的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄獲得GhMnaA2的cDNA
。
（2）過程②中在培養(yǎng)基中添加
抗生素
抗生素
可將含有重組質(zhì)粒的農(nóng)桿菌篩選出來。反義表達載體T-DNA區(qū)段的
E6啟動子和GhMnaA2基因
E6啟動子和GhMnaA2基因
片段整合到棉花細胞的染色體中，并在翻譯過程中起作用。
（3）過程③中目的基因?qū)朊藁毎?，可采?
PCR
PCR
技術從分子水平上檢測目的基因是否插入染色體；個體水平上的檢測為
觀察轉(zhuǎn)基因棉花的棉纖維是否變長
觀察轉(zhuǎn)基因棉花的棉纖維是否變長
。
（4）由圖分析可知，轉(zhuǎn)基因長絨棉棉纖維較普通棉棉纖維長的原因是
轉(zhuǎn)基因長絨棉細胞內(nèi)的反義GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA能與細胞內(nèi)的GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA互補配對，從而抑制該基因的表達，缺少3-甘露糖苷酶，半纖維素不被降解，從而使轉(zhuǎn)基因長絨棉的棉纖維長于普通棉花
轉(zhuǎn)基因長絨棉細胞內(nèi)的反義GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA能與細胞內(nèi)的GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA互補配對，從而抑制該基因的表達，缺少3-甘露糖苷酶，半纖維素不被降解，從而使轉(zhuǎn)基因長絨棉的棉纖維長于普通棉花
。

【答案】限制酶NotI會破壞目的基因，且質(zhì)粒上沒有NotI的切割位點；從棉花細胞中提取GhMnaA2的mRNA，逆轉(zhuǎn)錄獲得GhMnaA2的cDNA；抗生素；E6啟動子和GhMnaA2基因；PCR；觀察轉(zhuǎn)基因棉花的棉纖維是否變長；轉(zhuǎn)基因長絨棉細胞內(nèi)的反義GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA能與細胞內(nèi)的GhMnaA2基因轉(zhuǎn)錄的mRNA互補配對，從而抑制該基因的表達，缺少3-甘露糖苷酶，半纖維素不被降解，從而使轉(zhuǎn)基因長絨棉的棉纖維長于普通棉花
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：16引用：2難度：0.6
相似題

  • 1．基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　　）
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    發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

  • 2．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    （1）通過上述基因工程技術獲取目標產(chǎn)物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是
     
    （填寫下列編號）。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    （2）在PCR過程中，引物的功能是
     
    。
    A．啟動DNA復制
    B．規(guī)定擴增區(qū)間
    C．解旋DNA雙鏈
    D．充當復制模板
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    （3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設計的PCR引物應為圖甲中的
     
    。
    （4）獲取目的基因后，需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質(zhì)是
     
    （填DNA或RNA/DNA或RNA）。
    （5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    （6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質(zhì)粒pCLY15（圖丙中圖1）需用
     
    和
     
    切開，才能與MCO片段高效連接。
    （7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，用合適的限制酶切割
    B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
    C．從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
    D．將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5

  • 3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質(zhì)粒，可產(chǎn)生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。
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    若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質(zhì)粒，則產(chǎn)生的DNA片段的長度為（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
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